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15.1.1: Grampositive Stäbchen - Biologie

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Taxonomisch umfassen die pathogenen Gram-positiven Stäbchen Pathogene sowohl von Actinobakterien als auch von Firmicutes. Typischerweise werden diese Erreger jedoch phänotypisch in Endosporenbildner eingeteilt (Bazillus und Clostridium) und nicht sporenbildende Stäbchen. Die Nicht-Sporenbildner werden weiter unterteilt in säurefeste (Mykobakterium) und nicht säurefest (hier beispielhaft dargestellt durch .) Listerien). Die hier beschriebenen ausgewählten Krankheitserreger sind nur einige der relevantesten für diesen Kurs.


15.1.1: Grampositive Stäbchen - Biologie

Die infektiöse Lymphozele ist eine seltene postoperative Komplikation von Bauchoperationen, und nur wenige Studien haben sich auf ihre verursachenden Organismen konzentriert. Ziel dieser Forschung ist es, die Mikrobiologie und die geeignete empirische Behandlung der infektiösen Lymphozele aufzuklären.

Methoden

Wir führten zwischen April 2000 und März 2018 eine monozentrische, retrospektive Beobachtungsstudie mit Fallüberprüfung und Literaturrecherche durch. Die Daten wurden in einem Chart-Review gesammelt.

Ergebnisse

In unserer Einrichtung wurden 24 Fälle begründet. 153 Fälle, davon 16 Fälle aus unserer Einrichtung, in denen Erreger nachgewiesen wurden, wurden ebenfalls analysiert. Eine infektiöse Lymphozele wurde bei Krebspatienten nach gynäkologischen/urologischen Operationen festgestellt. Wir berichteten auch, dass die Bakteriämie-Inzidenz und die Sterblichkeitsrate bei infektiösen Lymphozele-Fällen sehr niedrig waren. Die Hauptorte der infektiösen Lymphozele waren das Becken oder der Leistenbereich.

Unsere Fallserien und Literaturrecherchen zeigten, dass grampositive Kokken die Hauptverursacher waren, mit Staphylococcus aureus ein Drittel davon (53/153 Fälle). Streptokokken-Spezies (26/153 Fälle) und Koagulase-negativ Staphylokokken (17/153 Fälle) waren die am zweit- und dritthäufigsten nachgewiesenen Organismen.

Abschluss

Bei gynäkologischen und urologischen Krebspatienten waren grampositive Kokken die häufigsten Erreger einer Lymphozele-Infektion. Eine grampositive Abdeckung könnte für eine empirische Therapie bei infektiöser Lymphozele sinnvoll sein.


15.1.1: Grampositive Stäbchen - Biologie

Parapneumonische Pleuraergüsse/Empyeme (PPE/PE) sind schwere Komplikationen einer ambulant erworbenen Pneumonie. Wir untersuchten die bakterielle Ätiologie und Inzidenz der pädiatrischen PPE/PE in Deutschland nach Einführung der universellen Pneumokokken-Konjugatimpfung (PCV) für Säuglinge.

Methoden

Kinder im Alter von <18 Jahren, die mit einer Pneumonie-assoziierten PSA/PE ins Krankenhaus eingeliefert wurden, die eine Pleuradrainage erforderte oder >7 Tage andauerten, wurden zwischen Oktober 2010 und Juni 2017 der Deutschen Überwachungsstelle für seltene Erkrankungen im Kindesalter gemeldet. Alle im Blut oder Pleuraflüssigkeit nachgewiesenen Bakterien (durch Kultur /PCR) wurden eingeschlossen, mit Serotypisierung für Streptokokken-Pneumoniee.

Ergebnisse

Das mediane Alter aller 1447 PPE/PE-Patienten betrug 5 Jahre (Interquartilbereich 3–10). Bei 488 der 1447 Kinder mit PPE/PE (34 %) wurden 541 Bakterien (>40 Arten) nachgewiesen. Aerobe grampositive Kokken machten 469 von 541 nachgewiesenen Bakterien aus (87%), diese waren am häufigsten Streptococcus pneumoniae (41%), Streptococcus pyogenes (19%) und Staphylococcus aureus (6%). Serotyp 3 machte 45 % von 78 Serotypisierungen aus S. pneumoniae Stämme. Die jährliche PPE/PE-Inzidenz variierte zwischen 14 (95 % CI 12–16) und 18 (95 % CI 16–21) PPE/PE pro Million Kinder. Vorkommen von S. pneumoniae PPE/PE sank von 3,5 (95%-KI 2,5–4,6) pro Million Kinder im Jahr 2010/11 auf 1,5 (95%-KI 0,9–2,4) im Jahr 2013/14 (p 0,002), gefolgt von einem erneuten Anstieg auf 2,2 (95 .). %KI 1,5–3,2) bis 2016/17 (S. 0,205).

Schlussfolgerungen

Im Zeitalter der weit verbreiteten PCV-Impfungen wurden Fälle von pädiatrischer PSA/PE noch hauptsächlich durch S. pneumoniae und zunehmend durch S. pyogenes. Der erneute Anstieg der Inzidenz von PSA/PE insgesamt und in S. pneumoniae-assoziierte PPE/PE weist auf anhaltende Veränderungen der bakteriellen Ätiologie hin und erfordert weitere Überwachung.


Mikrobiologisches Spektrum des Hirnabszesses in einem Krankenhaus der Tertiärversorgung in Südindien: 24-Jahres-Daten und -Überprüfung

Intrakranielle Abszesse sind lebensbedrohliche Infektionen, die nicht nur den Neurochirurgen, sondern auch die Mikrobiologen vor eine diagnostische Herausforderung stellen. Detaillierte Studien, die das Spektrum der Infektionserreger bei Hirnabszessen dokumentieren, sind aus Indien begrenzt. Materialen und Methoden. Dies ist eine retrospektive Analyse von 352 Proben aus den Jahren 1987 bis 2010, die von 1987 bis 2010 in einem Krankenhaus der Tertiärversorgung in Südindien analysiert wurden, um die sich ändernden Trends im Laufe der Zeit zu dokumentieren. Ergebnisse. Das Alter der Patienten reichte von 2 bis 80 Jahren, wobei eine größere Anzahl von Männern betroffen war. Otogene Infektionen waren die häufigste Ursache, während kryptogene Abszesse 20 % ausmachten. Gram-Färbung und Kultur-Positivität betrugen jeweils 78%. Grampositive und negative fakultative Aerobier und obligate Anaerobier waren ebenfalls auf dem Vormarsch. Ungewöhnliche Organismen, wie Burkholderia pseudomallei, Salmonella typhi, Nocardia-Arten, Cladosporium bantiana, Fonsecaea pedrosoi, Entamoeba histolytica und Acanthamoeba wurden auch aus Hirnabszessen isoliert und/oder nachgewiesen, die Gewebe absaugen oder resezierten. Zusammenfassung. Neue und neu auftretende Krankheitserreger, die mit Hirnabszessen assoziiert sind, insbesondere bei immunsupprimierten Personen, haben die Notwendigkeit einer Früherkennung erneuert und werden für die angemessene Behandlung von Patienten mit Hirnabszessen von großem Wert sein.

1. Einleitung

Intrakranielle Abszesse (normalerweise als Hirnabszess bezeichnet), obwohl sie in Industrieländern selten sind, sind schwere, lebensbedrohliche Infektionen [1–3]. Große Fortschritte wie stereotaktische neurochirurgische Verfahren, die Entdeckung neuerer Antibiotika, insbesondere Metronidazol gegen Anaerobier und Ceftriaxon, das die Blut-Hirn-Schranke effektiv durchdringt, und neuere bildgebende Verfahren zur Früherkennung von Hirnabszessen [3] haben zu einer erheblichen Verringerung der Mortalität [4, 5]. Trotz dieser Fortschritte bleibt der Hirnabszess eine potenziell tödliche Erkrankung des zentralen Nervensystems (ZNS), insbesondere in Entwicklungsländern [3–9].

Die Schwierigkeiten bei der Diagnose eines intrakraniellen Abszesses sind hauptsächlich auf protea klinische Manifestationen und Ähnlichkeiten in der Bildgebung und dem morphologischen Erscheinungsbild einiger intrakranieller Raumforderungen wie zystischen Gliomen und Metastasen zurückzuführen. Die häufige Verzögerung bei der Diagnosestellung macht diese Erkrankung für den Neurochirurgen zu einer erheblichen Herausforderung [8–10] bei der Behandlung des Falles.

Neue und neu auftretende Krankheitserreger, insbesondere bei immunsupprimierten Personen, haben erneut Bedenken hinsichtlich der Diagnose und Behandlung von Hirnabszessen geweckt und stellen den klinischen Mikrobiologen gleichermaßen vor Herausforderungen [1, 3, 7, 11]. Sorgfältige mikrobiologische Untersuchungen, einschließlich der kritischen mikroskopischen Untersuchung auf alle möglichen Infektionserreger und des Einsatzes eines detaillierten mikrobiellen Untersuchungsarmamentariums zur Isolierung des/der Organismus(s) aus dem Abszessmaterial und vom wahrscheinlichen primären Ursprungsort der Infektion an anderer Stelle im Körper, werden auf jeden Fall Hilfe bei der Identifizierung des ätiologischen Agens(s) [2, 9–11]. Diese Erkenntnisse werden es dem Neurochirurgen und dem Spezialisten für Infektionskrankheiten (ID) ermöglichen, den Hirnabszess rationaler und angemessener zu behandeln [5, 7, 8, 10].

Es ist erwähnenswert, dass ein Hirnabszess nicht nur ein neurochirurgischer Notfall, sondern auch ein mikrobiologischer Notfall und eine diagnostische Herausforderung für beide Disziplinen ist [1, 10, 12].

Ziel dieser retrospektiven Studie war es, die mikrobiologischen Befunde in den eitrigen Aspiraten und/oder Geweben aus Hirnabszessen zu analysieren und das sich in den letzten 24 Jahren beobachtete sich verändernde und sich entwickelnde Spektrum von Infektionserregern mit einem kurzen Rückblick auf andere Studien zu diskutieren.

2. Materialien und Methoden

Dies ist eine im Krankenhaus durchgeführte retrospektive mikrobiologische Analyse von 352 Hirnabszessmaterialien (eitrige Aspirate und/oder Gewebe), die zwischen 1987 und 2010 vom Mikrobiologielabor des Nizam Institute of Medical Sciences, einer tertiären Versorgung und einem Lehrkrankenhaus erhalten wurden , in Südindien. Die Daten wurden in zwei Gruppen analysiert – Gruppe I zwischen 1987 und 1993 (veröffentlichte Daten) [12] und Gruppe II zwischen 1994 und 2010, um die sich ändernden Trends in der mikrobiellen Flora und Behandlungsstrategien zu dokumentieren. (1) Die demografischen und klinischen Informationen der Patienten wurden aus der Abteilung für Krankenakten abgerufen. Als relevante Daten wurden Alter und Geschlecht der Patienten, intrakranielle Lokalisation des Abszesses bzw. der Abszesse, die wahrscheinliche primäre Quelle der Infektionserreger, die zur Bildung des Abszesses bzw. der Abszesse führten, erfasst. (2) Die mikrobiologischen Daten wurden aus den mikrobiologischen Aufzeichnungen abgerufen, die als Datenbank in der Abteilung Mikrobiologie geführt werden. (3) Wo immer das resezierte Hirnabszessgewebe erhalten wurde, wurden die histopathologischen Merkmale bestätigt, um die Kulturergebnisse zu ergänzen.

3. Mikrobiologische Untersuchungen

Proben, die zu jeder Tageszeit aus einem Hirnabszess (entweder durch ein Bohrloch oder eine Kraniotomie) entnommen und für mikrobiologische Untersuchungen eingereicht wurden, galten als Notfallproben und wurden sofort im mikrobiologischen Labor vorrangig verarbeitet.

Proben aus den Jahren 1987 bis 1993 (Studiengruppe I) [12] wurden nur für Bakterien (aerob und anaerob) durch routinemäßige mikrobiologische Verfahren aufbereitet [13]. (i) Gram-Färbung wurde bei allen Proben für Bakterien durchgeführt, während Zeihl Neelsen (ZN)-Färbung für säurefeste Bazillen (AFB) nur in einem Fall von tuberkulösem Hirnabszess durchgeführt wurde. (ii) Aerobe Kulturen wurden auf 7% Schafblut-Agar und McConkey-Agar durchgeführt und 48 Stunden bei 37 °C inkubiert, bevor sie als steril erklärt wurden. Alle positiven Kulturen wurden zur Identifizierung und Antibiotikaempfindlichkeit weiterverarbeitet [13]. (iii) Eine anaerobe Kultur wurde auf 7% Schafblut-Agarplatten durchgeführt und im Dynamicro Gaspak-System inkubiert. Metronidazol-Scheibe (5 μg) wurde platziert, um die Antibiotika-Empfindlichkeit von Anaerobiern zu beobachten. Metronidazol-empfindliche Isolate wurden als Anaerobier angesehen. Eine Gram-Färbung solcher Isolate wurde durchgeführt, um die Morphologie und die Gattung des Isolats zu bestätigen. Ein Aerotoleranztest wurde durchgeführt, um zu zeigen, dass diese Isolate obligate Anaerobier waren. (iv) Die Probe aus dem tuberkulösen Abszess zeigte AFB auf ZN-Färbung. Das Material wurde auf Lowenstein Jensens (LJ)-Medium angeimpft und das Isolat wurde als . identifiziert Mycobacterium tuberculosis (M.tb) basierend auf seiner Wachstumsrate und Anfälligkeit für para-Nitrobenzoesäure [12].

Der Rest der 302 Hirnabszessproben (Studiengruppe II) wurde zum Nachweis von Bakterien (Aerobier und Anaerobier), Mykobakterien, Pilzerreger einschließlich Nokardie und Aktinomyceten, und Parasiten, durch mikrobiologische Standardverfahren [13] und durch halbautomatische Identifizierungssysteme (Mini API und Vitek 2, bioMérieux, USA). Die verschiedenen verwendeten Nachweisverfahren entsprachen den Standardrichtlinien [13]. Die anaeroben Isolate wurden nur bis auf Gattungsebene identifiziert.

4. Ergebnisse

Die durchschnittliche Anzahl der zur mikrobiologischen Analyse erhaltenen Hirnabszessproben betrug 21 pro Jahr.

Hirnabszesse wurden in allen Lebensjahrzehnten diagnostiziert, im Alter von 2 bis 80 Jahren (Mittelwert von

) und ein männliches Übergewicht (das Verhältnis von Männern zu Frauen betrug 2,7 : 1). Der jüngste Patient (2 Jahre) entwickelte einen Frontallappenabszess mit zugrunde liegender Septikämie und wurde zur weiteren Behandlung an unser Institut überwiesen. Die älteste Patientin war eine 80-jährige Frau mit chronischer eitriger Mittelohrentzündung (CSOM) und Parietallappenabszess.

Tabelle 1(a) zeigt einen Vergleich zwischen den beiden Studiengruppen hinsichtlich Ort und Quelle der Infektion des Hirnabszesses. Die Tabellen 1(b) und 1(c) heben die topographische Verteilung der Abszesse und die wahrscheinliche Infektionsquelle hervor, die in Studiengruppe II dokumentiert wurden.

). (c) Ort und Quelle der Infektion von multiplen Hirnabszessen in Studiengruppe II (

In unserer Studie gab es 310 (88,1%) nichttraumatische und 42 (11,9%) posttraumatische Hirnabszesse. Solitäre Abszesse (313/352 88,9%) waren zwar häufiger, multiple Abszesse (39/302 12,9%), überwiegend otogen, wurden jedoch nur in der Studiengruppe II beobachtet. Es gab 6 Fälle von subduralem Empyem und 3 Fälle von extraduralen Abszessen. Der Rest der Hirnabszesse war intrakraniell und betraf das Hirnparenchym. Die Mehrzahl dieser intrazerebralen Abszesse befand sich in der Parietalregion 102/352 (28,9%), gefolgt vom Frontal- und Schläfenlappen (21%).

5. Mikrobielles Spektrum

Anfärbung und Mikroskopie des Hirnabszessmaterials (Eiter und/oder Gewebe) ergaben die Erreger in 41/50 (82%) [12] bzw. 221/302 (73,1%) der Fälle in den beiden Gruppen. In den übrigen Fällen wurden nur polymorphkernige Zellen gesehen, was auf einen entzündlichen Prozess hindeutet. Die Mikroskopie war bei allen Pilzen positiv, mykobakteriell, Nocardial, und parasitäre Abszesse. Allerdings war die Mikroskopie in 12 Bakterienkultur-positiven Fällen in Gruppe II negativ.

Mikrobiologische Kulturen für Bakterien, Mykobakterien, und Pilze (nur in der Studiengruppe II enthalten) zeigten die ätiologischen Erreger in 44/50 (88%) [12] und 203/302 (67,2%) Fällen in den beiden Gruppen. Das Spektrum der aus Hirnabszessen in beiden Gruppen isolierten Organismen wird in den Tabellen 2(a), 2(b) und 2(c) verglichen.

Gram-positive fakultative Aerobier wurden häufiger isoliert als die gram-negativen Aerobier. Von den Isolaten waren 35/44 (79,5%) und 158/203 (77,83%) fakultative Aerobier, 7/44 (15,9%) und 32/203 (15,8%) obligate Anaerobier und 2/44 (4,5%) und 7/203 (3,4 %) waren Mykobakterien. Nocardia Spezies 3/203 (1,5 %) und Pilzisolate 5/203 (2,5 %) wurden nur in Gruppe II beobachtet, wahrscheinlich aufgrund der umfangreichen angewandten Methoden. Die obligaten Anaerobier wurden hauptsächlich aus Hirnabszessen isoliert, die von Ohr-, Nasennebenhöhlen- und Mundinfektionen herrührten. Auch gemischte aerobe und anaerobe Abszesse wurden häufig angetroffen. Es gab 30 Mikroskopie-positive Abszesse mit sehr kleinen Gram-positiven Kokken in Paaren und/oder Ketten auf der Gram-Färbung, die anaeroben Kokken ähnelten. Aus diesen Proben konnten jedoch mit keiner der verwendeten Kulturmethoden Organismen gewonnen werden.

5.1. Bakterienisolate (Tabellen 2(a) und 2(b))
5.1.1. Fakultative Aerobier (180 Einzel- und 13 gemischte Aerobier, insgesamt 193) (Tabelle 2(a))

Staphylococcus aureus (S. aureus) (68/192, 35,2%) war das häufigste Isolat, oft als einzelnes Isolat. Im Vergleich zur Gruppe I ist die Inzidenz von S. aureus Infektionen waren etwa viermal so hoch (Tabelle 2(a)). Diese Isolate stammten normalerweise von Hirnabszessen im Zusammenhang mit CSOM und Traumafällen in der Studiengruppe II. Es gab 6/55 Methicillin-resistente S. aureus (MRSA)-Isolate aus Hirnabszessen nach einem Verkehrsunfall (RTA) und waren empfindlich gegenüber Vancomycin. Der Rest der Isolate war Methicillin-empfindlich S. aureus (MSSA) und empfindlich gegenüber einer Vielzahl von Antibiotika.

Enterokokken Spezies (34/193, 17,6%) wurden häufig aus den Fällen mit CSOM isoliert. Im Vergleich zur Studiengruppe I, Enterokokken schienen in unserem Zentrum bedeutende neu auftretende Krankheitserreger von Hirnabszessen zu sein. Die isolierten Arten waren E. avium, E. faecalis, und E. faecium. Alle Isolate zeigten eine hohe Empfindlichkeit gegenüber Betalactamen und Vancomycin. Die hohen Isolationsraten könnten auf die Verwendung von chromogenen Medien für die Primärkultur des Eiters und automatisierten Identifizierungssystemen wie dem Vitek 2 zurückzuführen sein.

Beta-hämolytische Streptokokken (22), alpha-hämolytische Streptokokken (8), und S. pneumoniae (5) waren überwiegend otogen und sehr empfindlich gegenüber Penicillin und anderen Betalaktamen. Die Isolierung dieser wichtigen Erreger erfolgte eher in der Studiengruppe II, oft als einzelne Isolate.

Aerobe Gram-negative Bazillen (62/193, 32,1%), obwohl hauptsächlich otogen, wurden diese Organismen auch häufig aus der Postkraniotomie und hämatogenen Abszessen isoliert. Die enterischen Bazillen, wie z Escherichia coli (E. coli), Klebsiella pneumoniae (K. pneumoniae), Enterobacter Spezies, Proteus Spezies, Morganella morganii, und Providencia stuartii waren die häufigen Isolate. Wie bei den Gram-positiven Erregern wurde eine Zunahme der Inzidenz der Gram-negativen Bazillen, insbesondere von multiresistenten und nosokomialen Erregern, beobachtet. E. coli und K. pneumoniae waren hochresistente Organismen, die ein erweitertes Spektrum produzierten β-Lactamase (ESBL). Nosokomiale Krankheitserreger wie z Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa) und Acinetobacter baumannii (A. baumannii) wurden ebenfalls isoliert.

5.1.2. Obligatorische Anaerobier (22 Single und 17 Mixed, Total 39)

Eine zunehmende Inzidenz von polymikrobiellen anaeroben Abszessen wurde dokumentiert. Das Spektrum der Anaerobier in dieser Studie ist in Tabelle 2(b) gezeigt.

5.1.3. Gelegentlich Gram-negative Bazillen
5.1.4. Mykobakterielle Spezies (8/352, 2,2%)

Alle 8 TB-Abszesse zeigten AFB im Mikroskop, und M. tb wurde durch Kultur auf LJ-Medium (Studiengruppe I) und BACTEC 460 TB-System (Becton Dickinson, USA) isoliert. In unserer Studiengruppe I wurden zwei Fälle von mykobakteriell Abszesse, (M. tb (1) und M. fortuitum (1) [12] wurden dokumentiert, während es in der Studiengruppe II 6 Fälle von tuberkulösen Hirnabszessen gab und einer ein gemischter Pilz- und TB-Abszess war [15].

5.1.5. Nocardiale Spezies (3/302, 1%)

Es gab 2 Parietallappenabszesse verursacht durch N. Asteroiden in unserer Gruppe (einer bei einem postrenalen Transplantationspatienten und der andere bei einem Fall von atopischer Dermatitis auf Steroiden). Wir berichteten auch über einen Fall einer jungen Frau mit Myzetom am Rücken, die sich mit einem epiduralen Abszess vorstellte. N. brasiliensis wurde aus den Nebenhöhlen der Haut und aus dem epiduralen Abszess Eiter isoliert [16].

5.2. Pilzerreger

In unserer Serie gab es 5 (1,7%) Fälle von pilzlichen Hirnabszessen, die in verschiedenen klinischen Situationen auftraten. Die Fälle mit Aspergillus Abszesse hatten einen tödlichen Ausgang.

Wir berichteten über einen Fall eines 23-jährigen immunkompetenten Mannes, der eine Kopfverletzung erlitt und aufgrund des neurotropen Pilzes einen Abszess in der kapsuloganglionären Region entwickelte. Cladophialophora bantiana [17]. Die Diagnose wurde auf der Grundlage der mikroskopischen, mykologischen und histopathologischen Befunde des aus dem Abszess gewonnenen Aspirats gestellt. Der Patient sprach klinisch auf Amphotericin B an.

5.3. Protozoen

6. Diskussion

Hirnabszesse sind seit Beginn der Hippokratischen Ära bekannt und bekannt [10, 11]. Im Wesentlichen ist ein Hirnabszess eine fokale intraparenchymale Eiteransammlung und wird basierend auf der anatomischen Lage oder dem ätiologischen Erreger, der ihn verursacht, klassifiziert. Es beginnt als lokalisierter Bereich von Cerebritis und entwickelt sich zu einer Ansammlung von Eiter, die von einer vaskularisierten Kapsel umgeben ist [5, 20].

Unsere Daten zeigen, dass die Inzidenz von Hirnabszessen in der neurochirurgischen Klinik weiterhin signifikant ist. Die durchschnittliche Inzidenz von Hirnabszessen unter allen raumfordernden Läsionen in unserem Institut liegt bei etwa 25 %. Jüngste Studien aus Indien haben durchschnittlich 9 bis 15 Fälle pro Jahr gemeldet [1, 7, 8], während Studien aus Industrieländern mit 5–12 Fällen pro Jahr eine geringere Zahl verzeichneten [10, 21, 22]. Nach unseren Daten und anderen Studien treten Hirnabszesse in allen Lebensjahrzehnten auf, mit einem männlichen Übergewicht [1, 6, 21, 22]. Die Gründe für das männliche Übergewicht sind jedoch nicht klar [1].

Das Spektrum der bei Hirnabszessen beobachteten Organismen hängt normalerweise von der primären Infektionsquelle ab. Gram-positive Kokken, insbesondere die Enterokokken, und gramnegative Bazillen, insbesondere E coli und K. pneumoniae, wurden in Gruppe II häufiger isoliert als in der früheren Gruppe I. Dies ist wahrscheinlich auf die Verwendung des Bact/Alert-Systems und die direkte Beimpfung der eitrigen Aspirate in die Flaschen zurückzuführen. Aus den Fällen der Gruppe II wurde eine größere Zahl antibiotikaresistenter gramnegativer Bazillen isoliert, wahrscheinlich aufgrund der erhöhten Zahl von Traumata in dieser Gruppe.

6.1. Otogene Abszesse

CSOM ist weiterhin die häufigste prädisponierende Erkrankung in allen Altersgruppen (24/50 (48%) und 118/302 (39%) in beiden Gruppen) bzw. Zeitgruppen. Andere Studien aus Indien dokumentierten auch CSOM als Hauptursache für Hirnabszesse, 49 % [1], 31,4 % [7] und 40 % [8]. Obwohl beobachtet wurde, dass sich die eitrige Erkrankung des Mittelohrs auf den Schläfenlappen oder das Kleinhirn ausdehnte [1, 23, 24], wurden in der Studiengruppe II möglicherweise mehrere otogene Abszesse, die häufig den Frontal- und Parietallappen betrafen, beobachtet, wahrscheinlich aufgrund einer arteriellen Verbreitung infektiöser Embolien . Eine direkte Ausdehnung kann auch durch eine Osteomyelitis in der Hinterwand der Stirnhöhle, Keilbein- und Siebbeinhöhle auftreten. Dieser direkte Weg der intrakraniellen Ausbreitung ist häufiger mit einer subakuten und chronischen Otitis und Mastoiditis als mit einer Sinusitis assoziiert [4]. Infektionen der Stirn- oder Siebbeinhöhle breiten sich im Allgemeinen auf die Stirnlappen aus. Odontogene Infektionen können sich über direkte Ausbreitung oder einen Weg in den intrakraniellen Raum ausbreiten, im Allgemeinen auf den Frontallappen [4].

Alle otogenen Abszesse in unserer Studie wiesen eine bakterielle Ätiologie (aerob und/oder anaerob) mit einer Kulturpositivität von 85 % auf. Gram-positive fakultative Aerobier waren die häufigsten Isolate dieser Abszesse, wie auch in anderen Studien belegt [1, 6, 7, 23, 24]. Ein ungewöhnlicher Fall von gleichzeitiger TB (M. tb) und Pilz (Fonsecaea pedrosoi) Infektionen mit der Mittelohrspalte, die den kraniovertebralen Übergang an der Schädelbasis ausdehnt und zerstört, wurden in unserem Zentrum erfolgreich behandelt und behandelt [15]. Unsere Studie und andere aus Indien legen eindeutig nahe, dass Mittelohrinfektionen aggressiv behandelt werden müssen, um die Häufigkeit von Hirnabszessen zu reduzieren [1, 24].

6.2. Odontogene Abszesse

Die Mund- und Zahnflora, hauptsächlich von den subgingivalen Stellen, ist als häufige Quelle von Hirnabszessen dokumentiert [25]. Diese Seiten bestehen normalerweise aus Streptococcus milleri und der Gram-negative anaerobe Bazillen. In der Studiengruppe II wurden zwei Fälle von odontogenen Abszessen festgestellt durch S. aureus und Prevotella melaninogenica.

6.3. Kardiogene Abszesse

Als Risikofaktoren für Hirnabszesse sind zyanotische angeborene Herzerkrankungen wie Fallot-Tetralogie (10/23, 43,5 %), Verlagerung der großen Gefäße (3/23, 13 %) und Dextrokardie (2/23, 0,08 %) dokumentiert [1, 8, 26, 27] und angeborene pulmonale arteriovenöse Malformationen [28]. Kardiogene Abszesse dokumentierten wir bei 18 % (9/50) in der Studiengruppe I [12] und 7,6 % (23/302) in der Studiengruppe II. Das Alter der Patienten mit kardiogenem Abszess betrug weniger als 20 Jahre, obwohl ein 45-jähriger Patient mit einem S. aureus Abszess.

Patienten mit zyanotischer Herzkrankheit haben einen Rechts-Links-Shunt von venösem Blut im Herzen, der den Lungenkreislauf umgeht, was zu Bakteriämie, Septikämie und infektiösen Thromboembolien, normalerweise im Gehirn, führt. Diese Patienten haben aufgrund chronischer Hypoxämie und sekundärer Polyzythämie auch schwach durchblutete Areale im Gehirn. Die oft multiplen Abszesse treten an der Kreuzung der grauen und weißen Substanz auf. Am häufigsten sind die Parietallappen aufgrund des großen Kalibers und der direkten Fortsetzung der A. cerebri media betroffen [9]. Die angeborenen arteriovenösen Anomalien werden zu einem Nidus für die Organismen, insbesondere Gram-positive, die sich auf das Gehirn ausbreiten und zur Entwicklung eines Hirnabszesses führen [1, 9]. Neunzehn der 23 (82,6%) kardiogenen Abszesse in unserer Serie waren durch Mikroskopie positiv für Bakterien und grampositive Kokken, einschließlich fakultativer Aerobier, und obligate Anaerobier wurden isoliert.

6.4. Traumatische Abszesse

Schädeltrauma, entweder nach Verkehrsunfall (21/302 7,2%) oder einer Kraniotomie (20/302 6,6%) ist in Studiengruppe II ein wichtiger Risikofaktor, der in Studiengruppe I wahrscheinlich nicht vorgekommen ist im Zusammenhang mit der Zunahme von zu schnell fahrenden Fahrzeugen und der Verfügbarkeit neurochirurgischer Einrichtungen. 36 der 41 Abszesse waren solitär, und der Parietallappen war die am häufigsten betroffene Stelle.

Die Mikroskopie zeigte Organismen in 92,7% der Abszesse, während 80,5 von ihnen kulturpositiv waren. S. aureus Infektionen traten bei den RTAs häufig auf, wahrscheinlich aufgrund der direkten Implantation des Organismus, der aus der normalen Flora der Schädelhaut stammte. Andererseits hatten die Abszesse nach der Kraniotomie ein Spektrum, das überwiegend von gramnegativen fakultativen Aeroben war und oft eine nosokomiale Infektion war. Diese Isolate, am häufigsten E coli und K. pneumoniae, hatte eine hohe Antibiotikaresistenz. Strenge aseptische Maßnahmen bei der postoperativen Versorgung der Operationswunde und Versorgung der intravaskulären Katheter sind bei diesen Patienten sehr wichtig und können nicht unterstrichen werden [6, 11].

Hirnabszesse nach der Kraniotomie aufgrund von C. bantiana wurden von anderen Zentren berichtet [29–31]. Die Eintrittspforte des Pilzes beruht entweder auf einer direkten Inokulation nach Schädeltrauma, entweder nach RTA oder Kraniotomie, Inhalation der Sporen oder einer hämatogenen Ausbreitung auf das Gehirn [31].

6.5. Hämatogene Abszesse

Eine Septikämie und/oder Sepsis an anderen Stellen des Körpers ist eine wahrscheinliche Ursache für die Ausbreitung des Organismus vom primär betroffenen Organ zum Gehirn. In der Studiengruppe II dokumentierten wir 10,9 % hämatogene Abszesse. Zwölf der Abszesse (36,4%) wiesen im Mikroskop keine nachweisbaren Organismen auf und waren in Kultur steril. Menon et al. verzeichneten 40% sterile Abszesse bei Patienten, die zuvor Antibiotika erhielten [1].

Die hämatogenen Abszesse, die auch metastasierende Abszesse von einem entfernten Standort aus bezeichnen, sind die häufigste Art in entwickelten Ländern [3]. Sie sind oft multipel und treten typischerweise an der Verbindung der weißen und grauen Substanz auf, wo der kapillare Blutfluss am langsamsten ist [9]. Sie werden häufiger entlang der Verteilung der mittleren Hirnarterien und der Parietallappen gesehen, wo der regionale Blutfluss am höchsten ist. Die häufigsten systemischen Infektionsquellen sind chronische Lungeninfektionen, Hautpusteln, bakterielle Endokarditis und Osteomyelitis. Besonders anfällig sind Personen mit einem Rechts-Links-Shunt als Folge einer angeborenen Herzkrankheit oder einer pulmonalen arteriovenösen Fehlbildung. Da es hämatogen ist, kann jeder Hirnlappen betroffen sein, und einige von ihnen können multiple sein [9, 28]. Obwohl berichtet wird, dass diese Abszesse eine gemischte Flora enthalten [32], waren die infizierten hämatogenen Hirnabszesse in der vorliegenden Serie monomikrobiell, da die Septikämie normalerweise monomikrobiell ist. Aus diesen Abszessen wurden häufiger gramnegative Erreger isoliert, obwohl ungewöhnliche gramnegative Organismen wie S. typhi und B. pseudomallei wurden aus dem hämatogenen Hirnabszess-Eiter isoliert.

6.6. Vorbestehende Lungenläsionen

Primärinfektionen oder sekundär infizierte Lungenhöhlen können insbesondere bei immungeschwächten Patienten eine prädisponierende Ursache für Hirnabszesse sein [4]. In Gruppe I wurden sechs Fälle von Hirnabszessen mit wahrscheinlichem pulmonalen Ursprung erfasst, darunter 1 M.tb., 1 M. fortuitum, und 4 bakterielle Abszesse [12]. In der Studiengruppe II gab es 3 Abszesse nachgewiesenen pulmonalen Ursprungs (Organismen wurden aus den Atemwegen isoliert), die wuchsen N. Asteroiden (ein Fall von postrenaler Transplantation) und M.tb (2 Fälle) bzw..

6.7. Urosepsis

Die Harnwegsinfektionen sind eine wichtige primäre Quelle für Hirnabszesse. Wir dokumentierten einen Abszess im unteren Mittelhirn bei einem Patienten mit Urosepsis. Der Abszess war steril, wahrscheinlich aufgrund einer vorherigen Antibiotikatherapie. Ein ähnlicher Bericht über Hirnabszess aufgrund von Urosepsis wurde in der Literatur berichtet [33].

6.8. Intrakranielle und meningeale Läsionen

Es wurde dokumentiert, dass ein Hirnabszess nach einer zusammenhängenden Ausbreitung von infizierten Herden innerhalb des Gehirns oder der Meningen oder einer Sekundärinfektion vorbestehender intrakranieller Läsionen auftritt [4, 33]. In unserer Studie wurden zwei Hirnabszesse von einem primären Infektionsherd innerhalb des Gehirns oder der Hirnhäute dokumentiert. Einer war ein Fall von Neurozystizerkose, bei dem ein Temporalabszess aufgrund von Neisseria-Meningitiden, wahrscheinlich eine sekundäre Infektion der zystischen Läsion. Der andere Fall war ein Fall von pyogener Meningitis, bei der ein frontoparietaler Abszess aufgrund von Peptostreptokokken Spezies.

6.9. Osteomyelitis des Kalvariums

Osteomyelitis der Schädelknochen kann ein primärer Fokus mit einer angrenzenden Ausbreitung auf das darunter liegende Parenchym sein [4], wie in unserer Studie festgestellt [14]. Wir dokumentierten einen ungewöhnlichen Fall von B. pseudomallei calvariale Osteomyelitis, die sich auf beide Parietallappen ausgebreitet hatte und sich medial bis zum Sinus sagittalis erstreckte [14]. In der Studiengruppe II traten zwei weitere Fälle von calvarialer Osteomyelitis mit sterilen Abszessen auf.

6.10. Immunsuppression

Eine Immunsuppression kann Patienten für die Entwicklung von Hirnabszessen prädisponieren. Mit der zunehmenden Zahl von Transplantationen, insbesondere Nierentransplantationen, in jüngster Zeit, ist dies ein bedeutendes aufkommendes Problem [9]. Eine durch Steroide induzierte Immunsuppression kann die Patienten auch für die Entwicklung eines Hirnabszesses prädisponieren.

Das bei immunsupprimierten Patienten beobachtete Erregerspektrum kann bei immunkompetenten Personen nicht gefunden werden, weshalb eine empirische Therapie bei diesen Patienten vermieden werden sollte [9]. Da auch die bildgebenden Merkmale des Abszesses in der Computertomographie oder Magnetresonanztomographie (MRT) bei der Diagnose nicht hilfreich sind, sollte nach Möglichkeit auf eine mikrobiologische Diagnostik geachtet werden, damit unverzüglich eine geeignete antimikrobielle Therapie eingeleitet werden kann. Der aus dem Abszess gewonnene Eiter sollte einer mikrobiologischen Untersuchung auf Pilzbestandteile, einschließlich AFB, unterzogen werden Nokardie und Parasiten neben den routinemäßigen aeroben und anaeroben Kulturen [1, 7, 9]. Diese kompromittierten Wirte mit eingeschränkter T-Lymphozyten- oder Makrophagenfunktion neigen dazu, Infektionen mit intrazellulären Pathogenen wie Pilzen (insbesondere Aspergillus Arten) und Bakterien wie Nokardie Arten [6, 11, 34], insbesondere aufstrebende Nocardial Spezies (N. cyriacigeorgica) [35].

In 3 Fällen von Nierentransplantation wurde ein Hirnabszess dokumentiert. Die angesaugten Materialien in Mikroskopie und Kultur zeigten ein Wachstum von A. flavus, N. Asteroiden, und S. pneumoniae zusammen mit S. aureus jeweils in den 3 Fällen (Tabelle 2(c)). Ein weiterer tödlicher Fall eines mykotischen Hirnabszesses bei atopischer Dermatitis unter immunsuppressiver Therapie mit Steroiden bei einem 5-jährigen weiblichen Kind und multiplen Parietalabszessen sekundär zu A. terreus und N. Asteroiden, die wahrscheinlich aus den Ohren oder der Lunge stammen, wurden festgestellt. Diaset al. dokumentiert einen Fall von Nocardial Hirnabszess bei einem älteren Mann mit unerkanntem Diabetes mellitus [34, 36].

6.11. Kryptogene Hirnabszesse

Diese Gruppe umfasst solche Abszesse, bei denen es keinen offensichtlich nachweisbaren primären Infektionsherd an anderer Stelle im Körper oder eine zugrunde liegende prädisponierende Erkrankung, die zu einer Infektion führt, gibt. Die berichtete Inzidenz solcher kryptogener Abszesse liegt nach mehreren Studien zwischen 15 und 22 % [1, 10, 34]. Die Organismen in den kryptogenen Abszessen stammen nachweislich aus den oberen Atemwegen und der Mundflora und bestehen hauptsächlich aus Streptokokken Arten und anaerob Kokken [1, 10]. In einer der Studien wurde ein offenes Foramen ovale mittels Echokardiogramm identifiziert und als möglicher Weg der Migration und Ansiedlung der Mundflora ins Gehirn vorgeschlagen [37].

Wir dokumentierten 23,3% Hirnabszesse als kryptogen. Obwohl die Mehrheit solitäre und sterile Abszesse waren (53/82, 64,6%), wurden die kulturpositiven kryptogenen Abszesse (19/82, 26,4%) hauptsächlich durch einen einzigen Gram-positiven fakultativen Aerobier (12/19) verursacht, darunter S. aureus (MSSA) war das vorherrschende Isolat. Die restlichen Fälle waren polymikrobiell.

7. Mikroskopie versus Kultur

Die Empfindlichkeit der Mikroskopie hängt von der Anzahl der Organismen in der Probe ab (10 3 KBE/ml). In unserer Studie war die Gram-Färbung in 30 kulturnegativen Fällen positiv, während sie in 12 kulturpositiven Fällen negativ war. Es besteht ein Bedarf an Methoden zur Verbesserung der Nachweisraten insbesondere durch Mikroskopie, einschließlich Fluoreszenzfärbung mit Acridinorange (Sensitivität (10 2 KBE/ml)) [13], Calcoflour Weiß für Pilzfäden und Auramin-Rhodamin-Fluoreszenzfärbung für Mykobakterien.

8. Kultur für verschiedene Organismen

Alle in unserer Studie verwendeten Kulturmethoden sollten die Isolierung der verschiedenen möglichen und kultivierbaren Erreger optimieren. Es hat sich gezeigt, dass eine direkte Inokulation und der Einsatz automatisierter Verfahren zur Kultivierung des Eiters unmittelbar nach seiner Aspiration die Ausbeute an Organismen erhöht [7, 38]. Die direkte Beimpfung der Eiterprobe in eine anaerobe BacT/Alert-Standardflasche (bioMérieux, USA) ermöglichte eine frühe und bessere Ausbeute der Organismen. Das unbelüftete, in Flaschen abgefüllte anaerobe Medium erleichtert das Wachstum sowohl von fakultativen als auch von obligaten Anaerobiern, und die Ausbeute wird durch den im bacT/Alert-System eingebauten Schüttelinkubator weiter gesteigert [38].

Trotz sorgfältiger konventioneller mikrobiologischer Verfahren waren in unserer Gruppe 6/50 (12 %) bzw. 99/302 (32,8 %) Abszesse steril. Die gemeldete Inzidenz steriler Abszesse aus anderen Zentren lag zwischen 0 % und 43 % [1, 7, 39]. Die Ausbeute an Organismen durch Kultur hängt auch direkt vom vorherigen Einsatz von Antibiotika ab [11]. Dies könnte einer der Gründe für eine erhöhte Inzidenz von sterilen Abszessen in Gruppe II unserer Studie sein.

Infektionen mit P. aeruginosa und A. baumannii werden durch zusammenhängende Erweiterung des Gehirns und der Hirnhäute von einem Ohr, Mastoid, Nasennebenhöhlenchirurgie oder diagnostischen Verfahren verursacht. Bei einigen Patienten ist die Beteiligung des ZNS auf eine Ausbreitung des Organismus durch infektiöse Endokarditis, Pneumonie oder Harnwegsinfektion zurückzuführen [3]. Diese Organismen haben sich in den letzten Jahren als wichtige und hochresistente nosokomiale Krankheitserreger herausgestellt.

Ein Hirnabszess aufgrund ungewöhnlicher gramnegativer Bazillen wurde nur in der Studiengruppe II beobachtet, wahrscheinlich aufgrund der verbesserten mikrobiologischen Diagnosetechniken und der verwendeten automatisierten Identifizierungssysteme. (ich) Salmonellen typhi ist ein seltener Erreger bei Hirnabszessen und breitet sich wahrscheinlich hämatogen im Gehirn aus [40]. (ii) B. pseudomallei (Mittel der Melioidose): Ein Hirnabszess ist eine Komplikation einer neurologischen Infektion [11]. Isolierung von B. pseudomallei aus der Probe bleibt der „Goldstandard“ in der Diagnose. Der Mikrobiologe sollte mit der Koloniemorphologie und dem Antibiogramm dieser wichtigen, aber nicht sehr anspruchsvollen Organismen vertraut sein. Ceftazidim bleibt in der Frühphase der Therapie das Medikament der Wahl, gefolgt von einer verlängerten Therapie mit Cotrimoxazol [14].

Anaerobe Hirnabszesse: Die früheren Studien zu Hirnabszessen aus Indien befassten sich speziell mit anaeroben Infektionen [41–43]. Die obligaten Anaerobier sind bedeutende Erreger eines Hirnabszesses und treten häufig als Mischinfektion entweder mit einem anderen Anaerobier oder einem fakultativ aeroben Erreger auf, wie in unserer Gruppe zu sehen ist. Sie sind im Allgemeinen mit otogenen und odontogenen Infektionen verbunden.

Anaerobier sind sehr anfällig für Metronidazol [41]. Nach der Ergänzung des antibiotischen Behandlungsschemas eines Hirnabszesses und der weit verbreiteten Anwendung ist die Inzidenz anaerober Infektionen zurückgegangen [1, 12, 41]. Die Beachtung geeigneter anaerober Isolationstechniken ist für eine gute Erholung unerlässlich [11, 13], wie die erhöhte Ausbeute an Anaerobiern in unserer Studiengruppe II zeigt (Tabelle 2(c)). Da konventionelle anaerobe Kulturen 2-3 Tage Inkubation benötigen, ist der Einsatz alternativer Techniken zur Früherkennung unabdingbar [44, 45].Die Gas-Flüssigkeits-Chromatographie (GLC) ist eine Routinemethode zur Identifizierung und Differenzierung von Anaerobiern von Aerobiern in klinischen Proben auf der Grundlage des Vorhandenseins von flüchtigen und nichtflüchtigen Fettsäuren im Chromatogramm. Die computergestützte GLC ist kommerziell erhältlich und dient der schnellen mikrobiellen Identifizierung [44, 45]. Allerdings sind die Ausstattung und die Kosten die limitierenden Faktoren für einen routinemäßigen Einsatz von GLC unter eingeschränkten Ressourcen.

Ein tuberkulöser Hirnabszess entsteht, wenn Mykobakterien Zugang zum Hirnparenchym über einen hämatogenen Weg von einem entfernten Ort, normalerweise der Lunge, erlangen, im Gegensatz zu TB-Meningitis, die durch lymphatische Ausbreitung von zervikalen Lymphknoten auftritt. Die TB-Bazillen werden in Endarterien immobilisiert, was zur Bildung submeningealer tuberkulöser Herde führt und entweder zu einem Tuberkulom führt oder eine zentrale Verkäsung und Verflüssigung zu einem Abszess erfährt [46–49]. Dieses Phänomen ist sehr selten und tritt häufig bei Patienten mit zellvermittelter Immunität auf und ist meistens fokal und normalerweise sekundär zu einem primären Herd in der Lunge. Histologisch und klinisch zeigen diese Abszesse keine granulomatöse Reaktion, ähnlich den pyogenen Abszessen [19].

Für eine angemessene Therapie und klinisches Management muss ein TB-Abszess von einem Tuberkulom unterschieden werden. Die 1978 von Whitener aufgestellten Kriterien zur Diagnose eines TB-Hirnabszesses sollten bei der Diagnose eines TB-Hirnabszesses erfüllt sein [50]. Dazu gehören (i) der Nachweis einer echten Abszessbildung im Gehirn, die während der Operation bestätigt wurde, (ii) der histologische Nachweis des Vorhandenseins von Entzündungszellen in der Abszesswand (histologisch sind die Abszesswände normalerweise frei von Epithel- und Riesenzellen, anders als bei einem Tuberkulom [13], und (iii) Nachweis von AFB und Isolierung von M.tb aus dem Abszess Eiter. Obwohl in diesen Daten nicht enthalten, hatten wir über einen Fall eines kalvarialen tuberkulösen osteomyelitischen Abszesses berichtet, der erfolgreich behandelt wurde [51].

Nocardial Hirnabszesse sind selten und machen etwa 1-2% aller Hirnabszesse aus [52–54]. Die Entität wird in der gegenwärtigen Ära der Transplantationsoperationen und immunsuppressiven Therapien zunehmend berichtet. Die Infektion kann als isolierte Läsion oder als Teil einer disseminierten Infektion einer Lungen- oder Hautinfektion auftreten [6, 11, 16, 34, 52, 53, 55]. Fast alle Patienten mit Nocardial Hirnabszesse haben eine defekte zellvermittelte Immunität [11]. Eine frühzeitige Erkennung und Behandlung sind sehr wichtig, da die Mortalität dreimal höher ist als bei anderen bakteriellen Hirnabszessen. Obwohl N. Asteroiden und N. brasiliensis sind die häufigsten Arten, andere Arten werden auch aus Hirnabszessen isoliert [52]. Die Diagnose von Nocardial Hirnabszess erfordert einen hohen klinischen Verdacht, mit dem Versuch einer frühzeitigen gewebe- und mikrobiologischen Diagnose [34].

Invasive Pilzinfektionen bleiben bei Kindern mit hämatologischen Malignomen eine lebensbedrohliche Komplikation. Das Gehirn ist ein häufiger Ort von hämatogen disseminierten Pilzinfektionen von einem extrakraniellen Herd [56]. Die zerebrale Aspergillose tritt in etwa 10 bis 20 % aller Fälle von invasiver Aspergillose auf und hat eine sehr schlechte Prognose. Das Ergebnis hängt von der Früherkennung des Erregers und dem rechtzeitigen Beginn einer antimykotischen Behandlung ab. Daher sollte jeder Versuch unternommen werden, Pilzfilamente im vorgelegten Hirnabszessmaterial nachzuweisen [11].

9. Alternative und fortgeschrittene Techniken zur Verbesserung des Nachweises des/der infizierenden Krankheitserreger(s)

Mikroskopie-positive, aber kulturnegative Abszesse, insbesondere die bakteriellen, sind keine Seltenheit und stellen eine Herausforderung für den/die Mikrobiologen dar. Die Organismen, oft die ernährungsphysiologisch anspruchsvollen Streptokokken Arten und die anaeroben Kokken, werden im Allgemeinen nicht auf Routinekulturmedien gewonnen. Auch Kulturen werden negativ sein, wenn die Anzahl der Organismen im Abszess-Eiter geringer ist. Solche Proben sollten idealerweise durch empfindlichere Assays auf den ätiologischen Wirkstoff aufbereitet werden. Gegenwärtig werden diese hochempfindlichen und hochentwickelten Assays zunehmend in fortgeschrittenen Zentren zu Forschungszwecken eingesetzt. (1) Eine Breitband-Echtzeit-Polymerase-Kettenreaktion (RT-PCR) unter Verwendung von 16srRNA oder DNA hilft, die wahrscheinliche bakterielle Nukleinsäure zu amplifizieren und nachzuweisen, wie mehrere Studien zeigen [57–62]. Eine anschließende Sequenzierung des amplifizierten Produkts wird durchgeführt, um die Spezifität weiter zu verbessern. Mit den jüngsten Fortschritten halten die molekularen Methoden allmählich Einzug in die Routinediagnostiklabore und könnten in den kommenden Jahren zu wichtigen primären Instrumenten bei der Früherkennung des ätiologischen Erregers werden. Allerdings sind die Spezifität und die Kosten dieser Assays wichtige limitierende Faktoren [63] in den unterentwickelten und Entwicklungsländern. (2) In vitro Kernspinresonanz (NMR) zum Nachweis des spezifischen Spektralmusters der Aminosäuren und anderer flüchtiger Substanzen, die durch Stoffwechselprozesse der Bakterien freigesetzt werden, wurde zur Unterscheidung von Abszessen von anderen raumfordernden Läsionen im Gehirn verwendet [64–66 ]. Der Bedarf an NMR mit sehr hohem Tesla und eine fachmännische Analyse und Interpretation der Spektralmuster sind jedoch die limitierenden Faktoren. (3) Gas-Flüssig-Chromatographie (GLC) an der Eiterprobe ist auch eine alternative Methode, insbesondere für die anaeroben Abszesse.

10. Schlussfolgerungen

Wie unsere Daten belegen, ist die Mikrobiologie intrakranieller Abszesse komplex. Der Nachweis und die Identifizierung des/der verursachenden Erreger(s) sind die Eckpfeiler der Diagnose für ein angemessenes Management und eine therapeutische Optimierung. Der Wert einer zeitnah ausgewerteten Mikroskopie gepaart mit akribischen und aufwendigen Kulturmethoden des Abszessmaterials ist nicht zu unterschätzen. Die hohe Ausbeute an positiven Kulturen wird es dem Neurochirurgen und dem Spezialisten für Infektionskrankheiten dann ermöglichen, Hirnabszesse rationeller und angemessener zu behandeln. Abszesse treten selten auf de novo im Gehirn [4, 11]. Es gibt fast immer eine primäre Läsion an anderer Stelle im Körper, die eifrig gesucht werden muss, da die Nichtbehandlung der primären Läsion zu einem Rückfall führt [11]. Die Notwendigkeit, Proben der primären Quelle des Hirnabszesses, insbesondere der Lunge, zu entnehmen, wenn ungewöhnliche Krankheitserreger aus dem Hirnabszess isoliert werden (auch bei kryptogenen Abszessen), wird durch unsere Serie betont.

Es ist ratsam, dass sich der Neurochirurg eng mit dem Mikrobiologen abstimmt und die Anwendung fortschrittlicher mikrobiologischer und molekularer Techniken sicherstellt, um neue und aufkommende Erreger von intrakraniellen Abszessen zu erkennen.

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Copyright © 2011 V. Lakshmi et al. Dies ist ein Open-Access-Artikel, der unter der Creative Commons Attribution License vertrieben wird und die uneingeschränkte Verwendung, Verbreitung und Reproduktion in jedem Medium erlaubt, vorausgesetzt, das Originalwerk wird ordnungsgemäß zitiert.


3. Ergebnisse und Diskussion

3.1. Molekulare und morphologische Identifizierung bakterieller Endophyten aus C. macowanii Laub

Endophyten bewohnen einzigartige biologische Nischen, die in ungewöhnlichen Umgebungen wachsen. Ihre Isolierung und Identifizierung ist für die weitere Exploration von entscheidender Bedeutung [49, 50]. In dieser Studie wurden insgesamt 9 bakterielle Endophyten aus den Blättern von . isoliert und charakterisiert C. macowanii. wie in Tabelle 1 zu sehen.

Sieben gramnegative Bakterien wurden beobachtet. Die phänotypische Diversität des Endophyten trägt zur Gram-Reaktion und Koloniemorphologie der Endophyten bei [51] und damit zur vielfältigen Endosphäre, während Wachstumsrate und Größe der Wirtspflanze auch einen Einfluss auf die vielfältige endophytische Gemeinschaft haben [52]. Die endophytische Pflanzengemeinschaft wird durch das Alter der Wirtspflanze, die geografische Lage und abiotische Faktoren wie die Temperatur beeinflusst [52, 53]. Dies würde die Vielfalt der isolierten bakteriellen Endophyten erklären.

Bakteriengattungen einschließlich Pseudomonas, Bazillus, und Burkholderia wurden als Endophyten aus Blättern von Heilpflanzen isoliert [54]. Diese Bakteriengattungen überwiegen in Heilpflanzen, da sie die Wirtspflanze bei der mineralischen Nährstoffzusammensetzung und dem Schutz vor abiotischen und biotischen Belastungen unterstützen [55]. Die BLAST-Suche der Ergebnisse der 16S-rDNA-Gensequenz ergab, dass die isolierten Endophyten zu Bakteriengattungen gehören, wie z Raoultella, Acinetobacter, Pseudomonas, Bacillus, Enterobacter, und Arthrobacter, wie in Abbildung 1 zu sehen . Dies unterstützt unsere beobachteten Ergebnisse.

Nachbar-verknüpfender phylogenetischer Baum von 16S rRNA-Gensequenzen von Endophyten isoliert aus C. macowanii Blätter, die die Verwandtschaft mit anderen ähnlichen Arten aus der GenBank zeigen.

Pseudomonas sind häufige Bakterien, die mit Pflanzen assoziiert sind und aus einer Reihe von Pflanzenarten und -geweben isoliert wurden. Sie wirken sich positiv auf das Wirtspflanzenwachstum aus, indem sie Trockenstress reduzieren und Pflanzenhormone wie 1-Aminocyclopropan-1-carbonsäure (ACC) und Indol-3-essigsäure (IAA) produzieren und als Biokontrollmittel wirken [26, 49 , 56, 57]. Unser Isolat TES05A zeigte 94% Ähnlichkeit mit Pseudomonas sp. WB4.4-99. Das endophytische Isolat TES14A zeigte eine Ähnlichkeit von 83% mit Pseudomonas cichorii PC-Gd-1. Endophytisch Pseudomonas cichorii wurde aus Kartoffelsorte isoliert [58]. Isolat TES06A zeigte eine 99%ige Ähnlichkeit mit Pseudomonas putida PF45. Endophytisch Pseudomonas putida wurden aus Mangoplantagen isoliert [59]. Isolat TES05B zeigte 99% Ähnlichkeit mit Pseudomonas palleroniana IHB B 7234. Endophyt Pseudomonas palleroniana wurde aus Bananen isoliert und soll freien Stickstoff fixieren, Phosphate solubilisieren und Siderophore produzieren in vitro [60].

TES02C zeigte eine Sequenzidentität von 100 % bis Acinetobacter guillouiae OTU-b62. Unterschiedlich Acinetobacter Arten wurden aus Kartoffelsorten isoliert [58]. TES15A-Isolate ergaben 100 % bis Arthrobacter pascens H19. Arthrobacter spp. wurde aus ethnomedizinischen Pflanzen in Südindien isoliert [61]. Bazillus Endophyten wurden aus Sonnenblumen, Kartoffeln und Baumwolle isoliert und unterstützen Wirtspflanzen bei der Phosphatsolubilisierung und Auxinproduktion [56]. Unsere endophytischen Isolate (TES07A und TES07B) zeigten 100% Ähnlichkeit mit Bacillus safensis TMV13-3. Bazillus spp. Die Isolate TES02B hatten eine Ähnlichkeit von 62 % zu Raoultella terrigena m 5. Endophytisch Raoultella ornithinolytica wurde aus Berg-kultivierten Ginseng-Pflanzen isoliert [62]. Eine Ähnlichkeit von 64 % wurde zwischen unserem Isolat TES10A und beobachtet Enterobacter asburiae E6 – 2. Endophytisch Enterobacter asburiae wurde aus Dattelpalme isoliert und fördert das Pflanzenwachstum [63].

Nach unserem besten Wissen ist dies der erste Bericht über die Isolierung von Arthrobacter pascens und Enterobacter asburiae von C. macowanii.

3.2. Antibakterielle Bewertung von rohen Bakterien-Endophyten-Extrakten aus den Blättern

Die niedrigste MHK (0,0625 mg/ml) wurde beobachtet von Arthrobacter pascens Rohextrakt und Rohextrakte gegen B. subtilis, bzw. Die Rohextrakte der meisten Endophyten wiesen MHK-Werte unter 1,00 mg/ml auf. Die Rohextrakte aus den Blättern zeigten eine bemerkenswerte Aktivität sowohl gegen Gram-positive als auch gegen Gram-negative Bakterien, wie in Tabelle 4 zu sehen ist.

Tabelle 4

Antibakterielle Bewertung von C. macowanii roher Blattextrakt und roher Endophytenextrakt aus den Blättern.

Testorganismus mit MHK (mg/ml)
Rohextrakte B. cereus B. subtilis S. epidermidis S. aureus M. smegmatis M. marinum E. aerogenes E coli K. Lungenentzündung P. vulgaris P. aeruginosa
T12.00 0.500 1.00 0.250 0.5002.008.00 0.250 0.250 0.500 0.125
T28.001.004.0016.00 1.00 0.500 1.00 0.500 0.500㸖.00 0.250
T34.004.0016.008.00 0.50016.0016.008.0016.008.0016.00
T4 0.500 0.125 0.125 0.5008.00 0.12516.00㸖.004.0016.008.00
T5㸖.002.004.004.008.00 0.500 1.002.00 0.500 0.250 1.00
T6㸖.004.008.0016.004.00㸖.0016.00㸖.00㸖.008.001.00
T7㸖.00 0.1252.00㸖.004.00 0.50016.00 0.2502.004.00㸖.00
T84.0016.008.002.00 0.500 0.1258.00 0.500 0.12516.002.00
T98.00 0.25016.00 1.00 0.1258.004.00 1.00 0.500 1.00 0.125
T102.00 0.06254.00 1.0016.00㸖.00 1.00 0.500㸖.002.004.00
Positivkontrolle MHK (μg/ml)
T110.0310.0310.0620.0310.0620.0620.1250.1250.1250.0620.031

C. macowanii Blätter werden traditionell zur Blutreinigung, zur Behandlung von Husten, Nieren- und Blasenerkrankungen bei Mensch und Tier sowie zur Behandlung von Husten und Durchfall verwendet [20]. Die in dieser Studie erhaltenen Ergebnisse zeigen die Hemmung von B. subtilis, M. smegmatis, und P. vulgaris bei 0,500 mg/ml und S. aureus, E coli, und K. Lungenentzündung wurden bei 0,250 mg/ml gehemmt und S. epidermidis und P. aeruginosa bei 1,00 mg/ml bzw. 0,125 mg/ml.

Diese Daten liefern eine wissenschaftliche Begründung für die ethnomedizinische Verwendung der Blätter, da die gehemmten Bakterien die Hauptverursacher der Krankheiten sind, zu deren Behandlung die Blätter verwendet werden. S. aureus, E coli, und K. pneumoniae wurden durch eine Endkonzentration von 250  . gehemmtμg·ml 𢄡 durch Alkaloide wie Crinin, Cheryllin, Crinamidin, 3-O-Acetylhamain und Bulbispermin, die aus isoliert wurden C. macowanii Blätter [64]. Unseres Wissens ist diese Studie die erste, die über die Gewinnung von Rohextrakt aus Blättern von C. macowanii und seine antibakterielle Wirkung.

Der Anbau von Pflanzen zur Gewinnung bioaktiver Verbindungen hat zu Nachteilen geführt, wie zum Beispiel Überernten von Pflanzen zur Gewinnung bioaktiver Verbindungen, unterschiedliche Umweltbedingungen neigen zu geringen Erträgen und Totalsynthese und Semisynthese sind aufgrund komplexer Strukturen eine Herausforderung [65]. Eine Reihe von endophytischen Mikroorganismen haben krebsbekämpfende, antimikrobielle, antidiabetische, insektizide und immunsuppressive Verbindungen produziert [66]. An verschiedenen Orten wachsende Pflanzen beherbergen möglicherweise Endophyten mit neuartigen Naturstoffen [66, 67].

Raoultella ornithinolytica Rohextrakt hatte MHK-Werte im Bereich von 0,250 bis 16  mg/ml, wobei die signifikanteste Hemmung beobachtet wurde für K. Lungenentzündung, E coli, und M. marinum bei Konzentrationen von 0,500 mg/ml und P. aeruginosa wurde bei Konzentrationen von 0,250 mg/ml gehemmt. Es wurde berichtet, dass Microcin-Gene auf Raoultella ornithinolytica [62] und Microcine sind antibakterielle Peptide, die von Enterobakterien [68]. Dies könnte die beobachteten Ergebnisse erklären. Acinetobacter guillouiae Rohextrakt zeigte MHK-Werte zwischen 0,500 und 16 mg/ml. Der Rohextrakt zeigte Aktivität gegen M. marinum bei 0,500 mg/ml.

Bacillus safensis Rohextrakt zeigte MHK-Werte zwischen 0,125 und 㸖 mg/ml. Der Rohextrakt zeigte Aktivität gegen B. subtilis, M.marinum, und E coli bei Konzentrationen von 0,125 mg/ml, 0,500 mg/ml bzw. 0,250 mg/ml. Rohe endophytische Extrakte von Bacillus safensis isoliert von Ophioglossum reticulatum L. zeigte antibakterielle Aktivität gegen Staphylococcus aureus und Escherichia coli [69]. Dies stimmt mit den erhaltenen Ergebnissen überein.

Enterobacter asburiae Rohextrakt zeigte MHK-Werte zwischen 0,125 und 16 mg/ml. Der Rohextrakt zeigte Aktivität gegen M. smegmatis und E coli bei Konzentrationen von 0,500 mg/ml und M. marinum und K. Lungenentzündung bei Konzentrationen von 0,125 mg/ml. Endophytische Rohextrakte von Enterobacter asburiae zeigte antibakterielle Wirkung gegen K. pneumoniae, E coli, S. aureus, und B. cereus. Enterobakterien Es wurde berichtet, dass Stämme [70] antibakterielle Lipopeptide mit einer breiten Aktivität produzieren [71]. Dies unterstützt die erhaltenen Ergebnisse.

Arthrobacter pascens Rohextrakt zeigte MHK-Werte zwischen 0,0625 und 㸖 mg/ml. Die aktivste Hemmung war gegen B. subtilis bei 0,0625 mg/ml. Der Rohextrakt zeigte Aktivität gegen S. aureus und E. aerogenes bei Konzentrationen von 1,00 mg/ml. Arthrobacilin, eine antibakterielle Verbindung, die von Arthrobacter spp., zeigte eine Hemmung gegen S. aureus [72, 73]. Dies könnte die beobachtete antibakterielle Aktivität erklären.

Pseudomonas sp. Rohextrakt zeigte MHK-Werte zwischen 0,0625 und 㸖 mg/ml. Die aktivste Hemmung war gegen M. marinum bei 0,0625 mg/ml. Mupirocin hergestellt von Pseudomonas Stämmen wurde eine antibakterielle Aktivität zugeschrieben [74]. Pseudomonas palleroniana Rohextrakt zeigte MHK-Werte zwischen 0,250 und 㸖 mg/ml. Die aktivste Hemmung war gegen P. vulgaris bei 0,250 mg/ml. Der Rohextrakt zeigte Aktivität gegen E. aerogenes und P. aeruginosa bei Konzentrationen von 1,00 mg/ml und M. marinum und K. Lungenentzündung bei Konzentrationen von 0,500 mg/ml. Endophytische Rohextrakte aus Pseudomonas palleroniana wurden berichtet, zu hemmen Escherichia coli und Staphylococcus aureus [50]. Pyoluteorin hergestellt von Pseudomonas palleroniana Es wurde berichtet, dass Stämme antibakterielle Aktivität aufweisen [75]. Pseudomonas putida Rohextrakt zeigte MHK-Werte zwischen 1,00 und 㸖 mg/ml. Die aktivste Hemmung war gegen P. aeruginosa bei 1,00 mg/ml. Die Antibiotika Pyoluteorin, Phenazin-1-carboxamid und Phenazin-1-carbonsäure wurden hergestellt von Pseudomonas putida Stämme [75]. Dies könnte die beobachtete antibakterielle Aktivität erklären. Pseudomonas cichorii Rohextrakt zeigte MHK-Werte zwischen 0,125 und 16 mg/ml. Der Rohextrakt zeigte Aktivität gegen E coli und P. vulgaris bei Konzentrationen von 1,00 mg/ml, M. smegmatis und P. aeruginosa bei Konzentrationen von 0,125 mg/ml, B. subtilis bei 0,250 mg/ml und K. Lungenentzündung bei 0,500 mg/ml. Nach unserem besten Wissen ist dies der erste Bericht über die antibakterielle Wirkung von rohen Endophytenextrakten aus Pseudomonas cichorii.

Coset al. [76] geben an, dass eine Konzentration von π,1 mg/ml für eine Rohprobe die ideale Konzentration für antiinfektiöse Bioassays ist, während [77, 78] Rohproben mit einer Konzentration von 1,00 mg/ml . empfehlen und � μg/ml (0,100 mg/ml) und � μg/ml gelten als sehr signifikant und mäßig signifikant und sind daher bemerkenswert für die minimale Hemmkonzentration. Um falsche Ergebnisse und Verwechslungen zu vermeiden, sollten strenge Endpunkte für antiinfektiöse Bioassays unter Berücksichtigung der Sensitivität von Extrakten und Testkeimen, Extraktionsmethoden und verwendeten Lösungsmitteln festgelegt werden [66, 67].

Aus den Ergebnissen wurde beobachtet, dass roher Endophytenextrakt aus Pseudomonas sp. und Arthrobacter pascens erhalten von C. macowanii Blätter hatten eine bemerkenswerte antibakterielle Wirkung gegen die in dieser Studie verwendeten pathogenen Bakterien und können als antibakterielle Mittel gegen und M. marinum und B. subtilis Infektionen bzw.

3.3. Anti-Krebs-Bewertung von rohen Bakterien-Endophyten-Extrakten aus den Blättern gegen resistente Krebszelllinien

Sekundärmetaboliten, die von endophytischen Mikroorganismen produziert werden, wirken als Antikrebsmittel und weisen ein erhebliches Potenzial in der medizinischen und veterinärmedizinischen Behandlung auf [79, 80].Die Krebsmittel Paclitaxel und Podophyllotoxin wurden aus endophytischen Mikroorganismen isoliert [81].

3.3.1. Anti-Krebs-Bewertung von rohen Bakterien-Endophyten-Extrakten aus den Blättern gegen A549-Lungenkarzinomzellen

Pseudomonas putida und Bacillus safensis Rohextrakte zeigten eine Zellreduktion von 47 % bzw. 50 % gegenüber Lungenkarzinomzellen bei einer Konzentration von 100 μg/ml wie in Abbildung 2 zu sehen.

Zytotoxische Aktivität von endophytisch abgeleiteten Sekundärmetaboliten und Rohextrakten auf A549-Lungenkarzinomzellen, getestet in verschiedenen Konzentrationen von 100 bis 3,13 μg/ml. Als Positivkontrolle wurde Auranofin verwendet. T1 = C. macowanii Blätter, T2 = Raoultella ornithinolytica, T3 = Acinetobacter guillouiae, T4 = Pseudomonas sp., T5 = Pseudomonas palleroniana, T6 = Pseudomonas putida, T7 = Bacillus safensis, T8 = Enterobacter asburiae, T9 = Pseudomonas cichorii, T10 = Arthrobacter pascens.

3.3.2. Anti-Krebs-Bewertung von rohen Bakterien-Endophyten-Extrakten aus den Blättern gegen UMG87-Glioblastom-Zellen

Acinetobacter guillouiae Rohextrakte zeigten eine 42%ige Reduktion der UMG87 Glioblastomzellen bei einer Konzentration von 6,25 μg/ml und Arthrobacter pascens Rohextrakte zeigten eine Zellreduktion von 37 % bei einer Konzentration von 12,5 μg/ml wie in Abbildung 3 zu sehen.

Zytotoxische Aktivität von endophytisch abgeleiteten Sekundärmetaboliten und Rohextrakten auf UMG87-Glioblastomzellen, getestet in verschiedenen Konzentrationen von 100 bis 3,13 μg/ml. Als Positivkontrolle wurde Auranofin verwendet. T1 = C. macowanii Blätter, T2 = Raoultella ornithinolytica, T3 = Acinetobacter guillouiae, T4 = Pseudomonas sp., T5 = Pseudomonas palleroniana, T6 = Pseudomonas putida, T7 = Bacillus safensis, T8 = Enterobacter asburiae, T9 = Pseudomonas cichorii, T10 = Arthrobacter pascens.

Nach unserem besten Wissen ist dies der erste Bericht über die Anti-Krebs-Aktivität von C. macowanii Rohextrakte hinterlassen. Bei den Rohproben der Blätter wurden keine nennenswerten Aktivitäten gegen beide in dieser Studie verwendeten Zelllinien beobachtet. Es wird festgestellt, dass bioaktive Verbindungen wie Lycorin, Pretazettin, Crinamin, Augustin und Galanthamin in C. macowanii Blätter und besitzen angeblich krebshemmende Wirkung [82�].

Nach unserem besten Wissen ist dies der erste Bericht über die Antikrebswirkung von rohen Endophytenextrakten aus Pseudomonas palleroniana, Bacillus safensis, Enterobacter asburiae, Arthrobacter pascens, und Pseudomonas cichorii.

Acinetobacter guillouiae roher Endophytenextrakt war die einzige getestete Probe, die Antikrebs gegen UMG87-Glioblastomzellen aufwies, mit einer 31%igen Zellreduktion bei 100 μg/ml und 53 % Zellreduktion bei 3,13 μg/ml, die als mögliches Antikrebsmittel gegen Hirnkrebs gelten.

Bacillus safensis Rohextrakte zeigten bemerkenswerte Aktivität gegen A549-Lungenkarzinomzellen mit 50 % Zellreduktion bei 100 μg/ml. Rohextrakte von Bacillus safensis aus Meeresschwämmen isolierte hatten eine Antikrebsaktivität gegen HepG2 (hepatozelluläres Karzinom), HCT (Kolonkarzinom) und MCF 7 (Brustkarzinom) [85]. Dies könnte die beobachteten Ergebnisse erklären und rohe Endophytenextrakte aus Bacillus safensis kann als Antikrebsmittel gegen Lungenkrebs verwendet werden.

Roher endophytischer Extrakt von Enterobacter asburiae, Pseudomonas sp., Arthrobacter pascens, und Pseudomonas palleroniana zeigte keine nennenswerte Aktivität gegen UMG87-Glioblastomzellen und A549-Lungenkarzinomzellen. Die Extrakte können an anderen Krebszelllinien getestet werden, um ihre Aktivität zu bestimmen. Pseudomonas sp. von denen bekannt ist, dass sie Antikrebsverbindungen produzieren, und es wurde berichtet, dass sie eine Aktivität gegen eine Reihe von menschlichen Krebszelllinien aufweisen [86, 87]. Pseudomonas sp. und Pseudomonas cichorii zeigte keine nennenswerte Aktivität gegen UMG87-Glioblastomzellen und A549-Lungenkarzinomzellen. Pseudomonas palleroniana Rohextrakte zeigten eine Zellreduktion von 36 % bei 100 μg/ml gegen A549 Lungenkarzinomzellen.

Rohe Endophytenextrakte aus Pseudomonas putida zeigte eine Zellreduktion von 47% bei 100 μg/ml gegen A549 Lungenkarzinomzellen. P. putida TJ151 kann Fluorouracil produzieren, das eine bioaktive aromatische Verbindung ist und ein Krebsmedikament ist [59]. L-Methioninase, ein Enzym, das von Pseudomonas putida, hat Antikrebsaktivität gegen Leukämiezelllinien, Leber HepG2, Brust MCF-7, Lunge A549, Prostata PC3 und Dickdarm HCT116 gezeigt [88, 89]. Methioninase aus P. putida und 5-Fluorouracil wirken synergistisch, um das Tumorwachstum und damit die beobachtete Aktivität zu hemmen [90].

Rohe Endophytenextrakte aus Raoultella ornithinolytica zeigte 43% Zellreduktion bei 100 μg/ml gegen A549 Lungenkarzinomzellen. Proteinkomplex aus R. ornithinolytica hat eine Antikrebsaktivität gegen die HeLa-Zelllinie, die humane endometrioide Ovarialkarzinomlinie (TOV 112D ATCC CRL-11731) und die humane Brust-Adenokarzinom-Linie (T47D ECACC 85102201) gezeigt, was zu einer zytopathischen Wirkung und einer Verringerung der Zellzahl führte [91, 92].

Rohe Endophytenextrakte von Raoultella ornithinolytica, Pseudomonas palleroniana, Pseudomonas putida, und Bacillus safensis können weiter gereinigt und auf ihre Antikrebsaktivität gegen andere Typen der Krebszelllinie getestet werden.

3.4. Flüssigkeitschromatographie Quadrupol-Flugzeit-Massenspektrometrie LC-Q-TOF-MS-Analyse

Die Isolierung und Charakterisierung von bioaktiven Sekundärmetaboliten hilft bei der Unterscheidung zwischen neuen und bereits bekannten bioaktiven Sekundärmetaboliten, die bei der Entwicklung und Entdeckung neuer Wirkstoffe helfen [93]. Lycorin und Powellin waren einige der identifizierten sekundären Metaboliten, die im Rohextrakt von C. macowanii Laub, Bacillus safensis, Pseudomonas cichorii, und Arthrobacter pascens. Diese sind in Tabelle 5 angegeben.

Tabelle 5

LC-Q-TOF-MS-Analyse von Rohextrakten von C. macowanii Blätter und ihre bakteriellen Endophyten.

Zusammengesetzter NameRt (min/s) m/zMolekularformelGemeldete biologische AktivitätStichprobe
Melikopicin5.64330.1351C18h19n1Ö5Antiplasmodiale Aktivität [94]T1
Lycorin1.92 13.76 36.75 7.23288.1236C16h17n1Ö4Antibakterielle zytotoxische und Antitumoraktivitäten [95]T1, T7, T9, T10
Angustine10.35 19.23 25.98 11.07314.1388C20h15n3Ö1Antiproliferative Aktivität [96]T1, T7, T9, T10
3-O-Methylepimacowin5.63288.1586C17h21NEIN3Krebs [97]T7
Crinamidin17.57 15.50 15.44 6.32318.1348C17h19n1Ö5Antibakterielle [21] Antikrebsaktivität [98]T1, T7, T9, T10
Vasicinol4.18 21.69 21.51 8.91205.0977C11h12n2Ö2Antibakterielle Aktivität [99]T1, T7, T9, T10
Aulicine1.99320.1870C18h25NEIN4Antikrebsaktivität [97]T9
Powelline19.14, 14.05, 17.98, 7.43302.1389C17h19n1Ö4Antitumor [100] antibakteriell [21]T1, T7, T9, T10
Brefeldin A11.52281.1702C16h24Ö4Antikrebs [101] und Antimykotikum [102]T10

An den Blättern wurde nicht viel gearbeitet, und nach unserem besten Wissen ist dies der erste Bericht über die Identifizierung von Sekundärmetaboliten aus Blättern von C. macowanii und deren Endophyten unter Verwendung von LC-Q-TOF-MS. Endophyten sind in der Lage, ähnliche Sekundärmetaboliten wie die Wirtspflanzen zu produzieren, indem sie Fragmente ihrer genomischen DNA mit der Wirtspflanze austauschen [103, 104]. Diese Sekundärmetaboliten erfüllen unterschiedliche Funktionen wie antibakterielle und krebsbekämpfende Aktivität, wie in dieser Studie durchgeführt [105]. Melicopicin ist ein Acridonalkaloid, das aus Blättern von . isoliert wird Teclea und Zanthoxylum Arten [94]. Ein Acridonalkaloid Melicopicin wurde isoliert aus Melicope fareana [106] und hat anthelmintische und antibakterielle Aktivitäten [107]. Dies würde die bemerkenswerte antibakterielle Aktivität des in dieser Studie beobachteten rohen Blattextrakts erklären.

Lycorin ist ein Alkaloid, das zuvor aus . isoliert wurde C. macowanii [108] Blätter von C. macowanii enthalten mehr Lycorin als die Zwiebeln und andere Pflanzenteile wie Wurzeln und Blüten [109]. Rohe Endophyten-Extras von Bacillus safensis, Pseudomonas cichorii, und Arthrobacter pascens zeigten das Vorhandensein von Lycorin, und dies ist nicht überraschend, da Endophyten Sekundärmetaboliten aus der Wirtspflanze metabolisieren können [104]. Von Lycorin wurde berichtet, dass es eine antibakterielle Aktivität sowie zytotoxische und Antitumoraktivitäten besitzt [95]. Dies würde die beobachtete antibakterielle und/oder Antikrebsaktivität der rohen Endophytenextrakte erklären.

Angustin ist ein Alkaloid, das zuvor aus Pflanzen der Familie der Rubiaceae und Loganiaceae isoliert wurde [110]. Nach unserem besten Wissen wird Angustin zum ersten Mal in C. macowanii Blattextrakte und seine isolierten Endophyten.

Aulicin und 3-O-Methyl-Epimacowin sind Alkaloide vom Crinin-Typ und wurden isoliert aus Hippeastrum aulicum Kraut. und Hippeastrum calyptratum Kraut. [110, 111]. Evidente und Kornienko [97] berichteten über die Antikrebseigenschaften dieser Krinin-Alkaloide. Dies würde die Anti-Lungenkrebs-Aktivität von Rohöl rechtfertigen Bacillus safensis Endophytenextrakte. Verschiedene Krebszelllinien können verwendet werden, um die Antikrebsaktivität von Rohöl zu bestimmen Pseudomonas cichorii Endophytenextrakte.

Das Alkaloid Crinin vom Typ Crinamidin wurde aus verschiedenen Pflanzen der Familie der Amaryllidaceae [113] sowie aus den Zwiebeln, Blütenstängeln, Blättern und Wurzeln von isoliert Crinum macowanii [21]. Crinamidin kommt in ganzen Pflanzenteilen der Crinum Arten [114] Powellin ist ein Alkaloid, von dem berichtet wird, dass es in C. macowanii [115] und Ndhlala et al. [115] berichteten über sein Vorkommen aus den Zwiebeln. Von beiden Alkaloiden vom Crinin-Typ wurde berichtet, dass sie eine antibakterielle, antitumorale und krebshemmende Wirkung besitzen [20, 98, 100]. Dies ist nicht besorgniserregend, da Endophyten sekundäre Verbindungen des Wirts metabolisieren können [105] und als Wirtspflanze eine Reihe biologischer Aktivitäten aufweisen.

Vasicinol ist ein Chinazolinalkaloid aus Adhatoda zeylanica Medizin. [117]. Rohe Endophytenextrakte von Bacillus safensis, Pseudomonas cichorii, und Arthrobacter pascens die Anwesenheit dieses Alkaloids zeigte, ist dies nicht überraschend, da einige Chinazolinalkaloide von Mikroben produziert werden [118]. Vasicinol kann an anderen resistenten pathogenen Bakterien getestet werden, um antimikrobielle Resistenzen zu bekämpfen, da seine antibakterielle Aktivität von Jain et al. [99].

Brefeldin A ist ein Pilzmetabolit, der von Spezies der Ascomyceten [119] produziert wird und unseres Wissens zum ersten Mal in bakteriellen Endophyten beschrieben wird. Von Brefeldin A wurde berichtet, dass es eine Antikrebsaktivität besitzt [101] verschiedene Krebszelllinien können verwendet werden, um seine Antikrebsaktivität mit verschiedenen Zelllinien zu bestimmen.

Aus den erhaltenen Ergebnissen wurden unterschiedliche Retentionszeiten zwischen den Blättern und bakteriellen Endophytenproben beobachtet, obwohl die gleichen Chromatographiebedingungen verwendet wurden. Faktoren wie die Affinität der Verbindungen zu den verwendeten Extraktionslösungsmitteln [120], die Polaritätsänderung der zu analysierenden Probe und Fragmente, die die nachgewiesenen Sekundärmetaboliten bilden [121] und die Bildung von Sekundärmetaboliten-Komplexen mit Extraktionslösungsmitteln verwendet, um die unterschiedlichen beobachteten Retentionszeiten zu beeinflussen, da sie eine Probenmatrix bilden [122].

Die identifizierten Alkaloide Lycorin, Crinamidin und Powellin sind echte Alkaloide der Familie der Amaryllidaceae [120, 124], was die erhaltenen Ergebnisse wie Crinum macowanii gehört zu dieser Pflanzenfamilie. Die Verfügbarkeit dieser Alkaloide führt zu einer Übernutzung und Übernutzung von C. macowanii um diese bioaktiven Verbindungen zu erhalten [65, 125]. Die Bioprospektion von Endophyten-isolierten Metaboliten könnte dazu beitragen, die Umwelt zu retten, da berichtet wurde, dass Endophyten ähnliche bioaktive Verbindungen wie die Wirtspflanze enthalten [66, 126] und in einigen Fällen Heilpflanzen erhalten werden und Einnahmen durch die Bioprospektion von Metaboliten aus Endophyten erzielt werden [127].


Labilibaculum antarcticum sp. nov., ein neuartiges fakultativ anaerobes, psychorotorierendes Bakterium, das aus Meeressedimenten der Antarktis isoliert wurde

Ein neues fakultativ anaerobes und fakultativ psychrophiles Bakterium mit der Bezeichnung SPP2 T wurde aus einem antarktischen Meeressediment isoliert. Es wurde beobachtet, dass die Zellen des Isolats lange Stäbchen (0,5 × 5–10 μm), Gram-Färbung-negativ und gleitbeweglich waren. Für das Wachstum wurde eine optimale NaCl-Konzentration von 2–3% und eine optimale Temperatur von 18–22 °C gefunden. Der Stamm SPP2 T kann in Gegenwart von Laktat kein Sulfat und Nitrat als Elektronenakzeptoren verwenden. Der G+C-Gehalt der genomischen DNA wurde mit 36,0 Mol-% bestimmt. Die wichtigsten zellulären Fettsäuren wurden als anteiso-C . identifiziert15:0 und iso-C15:0. Es wurde festgestellt, dass MK-7 das vorherrschende respiratorische Chinon ist. Eine phylogenetische Analyse basierend auf dem 16S rRNA-Gen ergab, dass der neue Stamm zur Familie gehört Marinfilaceae und eng verwandt sein mit Labilibaculum manganireducens 59,10-2M T mit einer 16S rRNA-Gensequenzidentität von 98%. Die OrthoANI- und dDDH-Werte zwischen den Genomsequenzen des Stamms SPP2 T und seines nahen Verwandten lagen mit 84 % bzw. 27,3 % unter den Schwellenwerten für die Speziesabgrenzung. Auf der Grundlage einer phylogenetischen und phänotypischen Charakterisierung Labilibaculum antarcticum sp. Nov. wird mit dem Typstamm SPP2 T (= NBRC 111151 T = CECT 9460 T ) vorgeschlagen.

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Abstrakt

Die antimikrobiellen Lipopeptide Polymyxin B und E (Colistin) werden als „Last-Line“-Therapie bei Infektionen durch multiresistente gramnegative Erreger eingesetzt. Polymyxin-Resistenz bedeutet einen völligen Mangel an Antibiotika zur Behandlung lebensbedrohlicher Infektionen, die durch die gramnegativen „Superbugs“ verursacht werden. Dieser Bericht beschreibt das auf Struktur-Aktivitäts-Beziehungen (SAR) basierende Design, im Ganzen Synthese und präklinische Bewertung einer Reihe neuer Polymyxin-Lipopeptide mit besserer antibakterieller Aktivität gegen Polymyxin-resistente gramnegative Bakterien.


15.1.1: Grampositive Stäbchen - Biologie

Gilbert Van Stappen
Labor für Aquakultur & Artemia Referenzzentrum
Universität Gent, Belgien

4.2.1. Biologie der Zyste

4.2.1.1. Zystenmorphologie

Eine schematische Darstellung der Ultrastruktur einer Artemia-Zyste ist in Abb. 4.2.1 dargestellt.

Abbildung 4.2.1. Schematische Darstellung der Ultrastruktur einer Artemia-Zyste. (modifiziert nach Morris und Afzelius, 1967)

Die Zystenhülle besteht aus drei Schichten:

· Alveolarschicht: eine harte Schicht aus mit Chitin und Hämatin imprägnierten Lipoproteinen Die Hämatinkonzentration bestimmt die Farbe der Schale, d. h. von blass bis dunkelbraun. Seine Hauptfunktion besteht darin, den Embryo vor mechanischen Störungen und UV-Strahlung zu schützen. Diese Schicht kann durch Oxidationsbehandlung mit Hypochlorit (= Zystenentkapselung, siehe 4.2.3.) vollständig entfernt (aufgelöst) werden.

· äußere Kutikularmembran: schützt den Embryo vor dem Eindringen von Molekülen, die größer als das CO 2 -Molekül sind (= mehrschichtige Membran mit ganz besonderer Filterfunktion wirkt als Permeabilitätsbarriere).

· embryonale Kutikula: eine transparente und hochelastische Schicht, die durch die innere Kutikularmembran vom Embryo getrennt ist (entwickelt sich während der Brutzeit zur Schlüpfmembran).

Der Embryo ist eine undifferenzierte Gastrula, die bei Wasserspiegeln unter 10 % metabolisch ist und über lange Zeiträume gelagert werden kann, ohne ihre Lebensfähigkeit zu verlieren. Die Lebensfähigkeit wird beeinträchtigt, wenn der Wasserspiegel höher als 10 % ist (Beginn der Stoffwechselaktivität) und wenn Zysten Sauerstoff ausgesetzt sind, dh in Gegenwart von Sauerstoff führt die kosmische Strahlung zur Bildung von freien Radikalen, die spezifische enzymatische Systeme in den ametabolen Artemiazysten zerstören .

4.2.1.2. Physiologie des Schlüpfprozesses

Die Entwicklung einer Artemia-Zyste von der Inkubation im Schlüpfmedium bis zur Nauplius-Freisetzung ist in Abb. 4.2.2 dargestellt.

Abbildung 4.2.2. Entwicklung einer Artemia-Zyste von der Inkubation in Meerwasser bis zur Nauplius-Freisetzung.

Bei Inkubation in Meerwasser schwillt die bikonkave Zyste an und wird innerhalb von 1 bis 2 h kugelförmig. Nach 12 bis 20 h Hydratation platzt die Zystenhülle (einschließlich der äußeren Kutikularmembran) (=Bruchstadium) und der von der Schlüpfmembran umgebene Embryo wird sichtbar. Der Embryo verlässt dann die Schale vollständig und hängt unter der leeren Schale (die Schlüpfhaut kann noch an der Schale befestigt sein). Durch die transparente Schraffurmembran kann man die Differenzierung des Pränauplius in den Instar I Nauplius verfolgen, der seine Anhängsel zu bewegen beginnt. Kurz darauf bricht die Schlüpfhaut auf (= Schlüpfen) und die freischwimmende Larve (Kopf voran) wird geboren.

Trockenzysten sind sehr hygroskopisch und nehmen schnell Wasser auf. e. innerhalb der ersten Stunden erhöht sich das Volumen des hydratisierten Embryos auf maximal 140 % Wassergehalt Abb. 4.2.3. Der aktive Stoffwechsel beginnt jedoch ab einem Wassergehalt von 60 %, sofern die Umgebungsbedingungen günstig sind (siehe weiter unten).

Der aerobe Stoffwechsel im Zystenembryo sorgt für die Umwandlung der Kohlenhydratreserve Trehalose in Glykogen (als Energiequelle) und Glyzerin.

Abbildung 4.2.3. Zellstoffwechsel bei Artemia-Zysten in Abhängigkeit vom Hydratationsgrad.

Erhöhte Spiegel der letzteren hygroskopischen Verbindung führen zu einer weiteren Wasseraufnahme durch den Embryo. Infolgedessen baut sich der osmotische Druck innerhalb der äußeren Kutikularmembran kontinuierlich auf, bis ein kritischer Wert erreicht wird, was zum Aufbrechen der Zystenhülle führt, wobei das gesamte produzierte Glycerin im Schlüpfmedium freigesetzt wird. Mit anderen Worten, der Metabolismus in Artemia-Zysten vor dem Aufbrechen ist ein Trehalose-Glycerin-hyperosmotisches Regulationssystem. Dies bedeutet, dass mit steigendem Salzgehalt im Inkubationsmedium höhere Konzentrationen an Glycerin aufgebaut werden müssen, um die kritische Differenz des osmotischen Drucks zu erreichen, die zum Platzen der Schale führt und somit weniger Energiereserven im Nauplius verbleiben .

Nach dem Aufbrechen steht der Embryo durch die Schlüpfmembran in direktem Kontakt mit dem externen Medium. Ein effizientes ionisches osmoregulatorisches System ist nun wirksam, das mit einer großen Bandbreite an Salzgehalten zurechtkommt, und der Embryo differenziert sich in eine sich bewegende Nauplius-Larve.Ein Schlüpfenzym, das im Kopfbereich des Nauplius sezerniert wird, schwächt die Schlüpfmembran und ermöglicht es dem Nauplius, sich in das Schlüpfmedium freizusetzen.

4.2.1.3. Einfluss von Umweltbedingungen auf den Zystenstoffwechsel

Trockenzysten (Wassergehalt von 2 bis 5% siehe Arbeitsblatt 4.2.1. für die Bestimmung des Wassergehalts und Tabelle 4.2.6. für ein praktisches Beispiel) sind sehr resistent gegen extreme Temperaturen bis +60°C und über 60°C und bis zu 90°C werden nur kurze Expositionen toleriert.

Hydratisierte Zysten haben weitaus spezifischere Toleranzen mit Mortalitäten unter -18°C und über +40°C eine reversible Unterbrechung des Stoffwechsels (= Lebensfähigkeit nicht beeinträchtigt) zwischen -18°C und +4°C und zwischen ± 33& #176C und ± 40°C, wobei die oberen und unteren Temperaturgrenzen von Sorte zu Sorte leicht variieren. Der aktive Zystenstoffwechsel liegt zwischen +4°C und 䕅°C der Schlupfprozentsatz bleibt konstant, aber die Nauplien schlüpfen früher, wenn die Temperatur höher ist.

Wie bei anderen Umgebungsbedingungen werden optimale Schlüpfleistungen im pH-Bereich von 8-8,5 erreicht. Folglich führt die Zugabe von NaHCO 3 , bis zu 2 g.l -1 , zu künstlichem oder verdünntem Meerwasser oder zu dichten Zystensuspensionen zu einem verbesserten Schlüpfen. Dies könnte mit dem optimalen pH-Aktivitätsbereich für das Schlüpfenzym zusammenhängen.

Eine verstärkte Schraffur wurde mit steigendem Sauerstoffgehalt im Bereich von 0,6 und 2 ppm berichtet, und eine maximale Schraffur wurde oberhalb dieser Konzentration erreicht. Um Sauerstoffgradienten während des Schlüpfens zu vermeiden, ist es offensichtlich, dass eine gute homogene Durchmischung der Zysten im Inkubationsmedium erforderlich ist.

Wie oben erwähnt, verbraucht das Schlüpfen in einem Medium mit höherem Salzgehalt mehr Energiereserven des Embryos. Oberhalb eines Schwellenwertes (von Stamm zu Stamm unterschiedlich, 䕾 g.l -1 für die meisten Stämme) können nicht genügend Wasser aufgenommen werden, um den Stoffwechsel des Embryos zu unterstützen. Der optimale Salzgehalt für das Schlüpfen ist ebenfalls stammspezifisch, liegt jedoch im Allgemeinen im Bereich von 15-70 g.l -1 .

Obwohl die physiologische Rolle des Lichts während des Schlüpfprozesses wenig verstanden ist, benötigen Salinenkrebszysten, wenn sie hydratisiert und unter aeroben Bedingungen sind, eine minimale Lichtauslösung für den Beginn des Schlüpfprozesses, bezogen auf die Lichtintensität und/oder die Expositionszeit.

Aufgrund der metabolischen Eigenschaften von hydratisierten Zysten lassen sich eine Reihe von Empfehlungen bezüglich ihrer Anwendung formulieren. Wenn Zysten (sowohl entkapselt als auch nicht entkapselt) über einen längeren Zeitraum gelagert werden, müssen einige Vorkehrungen getroffen werden, um den maximalen Energiegehalt und die Schlüpfbarkeit aufrechtzuerhalten. Die Schlüpfbarkeit von Zysten wird weitgehend durch die Bedingungen und Techniken bestimmt, die für die Entnahme, Reinigung, Trocknung und Lagerung des Zystenmaterials angewendet werden. Die Auswirkungen der meisten dieser Prozesse können mit den Auswirkungen der Dehydratation oder der kombinierten Dehydratation/Hydratation zusammenhängen. Bei Diapausen-Zysten können diese Faktoren auch den Prozess der Diapause-Induktion/-Beendigung beeinträchtigen, aber bei ruhenden Zysten führen unkontrollierte Dehydratation und Hydratation zu einem signifikanten Rückgang der Lebensfähigkeit der Embryonen.

Die Schlüpfqualität bei gelagerten Zysten nimmt langsam ab, wenn die Zysten einen Wassergehalt von 10 bis 35% H 2 O enthalten. Dieser Prozess kann jedoch verzögert werden, wenn die Zysten bei Gefriertemperaturen gelagert werden. Der genaue optimale Wasserstand innerhalb der Zyste (ca. 5%) ist nicht bekannt, obwohl es Hinweise darauf gibt, dass eine zu starke Dehydration (bis zu 1-2%) zu einem Rückgang der Lebensfähigkeit führt.

Wasserspiegel im Bereich von 30-65% initiieren Stoffwechselaktivitäten und reduzieren schließlich den Energiegehalt auf ein Niveau, das nicht ausreicht, um den Schlüpfzustand unter optimalen Schlüpfbedingungen zu erreichen. Eine Erschöpfung der Energiereserven wird außerdem erreicht, wenn die Zysten nachfolgende Dehydrations-/Hydratationszyklen durchlaufen. Die Langzeitlagerung eines solchen Materials kann zu einer erheblichen Verringerung des Schlüpfergebnisses führen. Zysten, die zu lange einem Wassergehalt von mehr als 65 % ausgesetzt waren, haben ihre Embryonalentwicklung vor der Emergenz abgeschlossen, die anschließende Austrocknung dieser Zysten führt im schlimmsten Fall zur Abtötung der differenzierten Embryonen.

Ausreichend dehydratisierte Zysten behalten ihre Lebensfähigkeit nur, wenn sie unter Vakuum oder in Stickstoff aufbewahrt werden. Die Anwesenheit von Sauerstoff führt zu einer erheblichen Erschöpfung der Schlüpfleistung durch die Bildung hochschädlicher freier Radikale. Auch gut verpackte Zysten sollten vorzugsweise bei niedrigen Temperaturen aufbewahrt werden. Im gefrorenen Zustand sollten die Zysten jedoch eine Woche bei Raumtemperatur akklimatisiert werden, bevor sie schlüpfen.

4.2.1.4. Diapause

Da Artemia ein Bewohner von Biotopen ist, die durch instabile Umweltbedingungen gekennzeichnet sind, wird ihr Überleben in Zeiten extremer Bedingungen (z. B. Austrocknung, extreme Temperaturen, hoher Salzgehalt) durch die Produktion von ruhenden Embryonen sichergestellt. Artemia-Weibchen können in der Tat als schnelle Reaktion auf schwankende Umstände leicht von der Produktion lebender Nauplien (Ovoviviparität) zur Zystenbildung (Oviparität) wechseln. Obwohl die grundlegenden Mechanismen dieses Wechsels noch nicht vollständig verstanden sind, scheinen plötzliche Schwankungen die Oviparität auszulösen (Sauerstoffstress, Salzgehaltsänderungen. ). Der auslösende Mechanismus zur Induktion des Zustandes der Diapause ist jedoch noch nicht bekannt. Im Prinzip befinden sich Artemia-Embryonen, die als Zysten im Medium freigesetzt werden, in der Diapause und werden ihre Entwicklung auch unter günstigen Bedingungen nicht fortsetzen, bis sie in diesem Stadium einen die Diapause deaktivierenden Umweltprozess durchlaufen, der Stoffwechselstillstand wird durch interne Mechanismen reguliert und kann nicht von einem nicht lebenden Embryo zu unterscheiden. Bei Unterbrechung der Diapause treten Zysten in das Ruhestadium ein, was bedeutet, dass die Stoffwechselaktivität in dem Moment, in dem sie unter günstigen Schlüpfbedingungen gebracht werden, wieder aufgenommen werden kann, was schließlich zum Schlüpfen führt: In dieser Phase ist der Stoffwechselstillstand eindeutig von äußeren Faktoren abhängig (Abb 4.2.4.). Dadurch kommt es zu einem synchronen Schlüpfen, was zu einem schnellen Start und einer konsequenten Entwicklung der Population kurz nach der Wiederherstellung günstiger Umweltbedingungen führt. Dies ermöglicht eine effektive Besiedlung in temporalen Biotopen.

Für den Anwender von Artemia-Zysten haben sich mehrere Techniken zur Beendigung der Diapause bewährt. Es ist hier wichtig anzumerken, dass die Sensitivität von Artemia-Zysten gegenüber diesen Techniken eine Stamm- oder sogar Chargenspezifität zeigt, daher die Schwierigkeit, die Auswirkung auf das Schlüpfergebnis vorherzusagen. Bei der Arbeit mit neuen oder relativ unbekannten Stämmen muss der relative Erfolg oder Misserfolg bestimmter Methoden empirisch ermittelt werden.

In vielen Fällen ist die Entfernung von Zystenwasser ein wirksamer Weg, um den Zustand der Diapause zu beenden. Dies kann durch Trocknen der Zysten bei Temperaturen von nicht mehr als 35-40 °C oder durch Suspendieren der Zysten in einer gesättigten NaCl-Solelösung (300 g.l -1 ) erreicht werden. Da eine Form der Dehydration Teil der meisten Verarbeitungs- und/oder Lagerungsverfahren ist, erfordert die Beendigung der Diapause keine besondere zusätzliche Manipulation. Bei einigen Arten von Artemia-Zysten liefern die üblichen Zystenbearbeitungstechniken jedoch keine ausreichend hohe Schlüpfqualität, was darauf hindeutet, dass eine spezifischere Methode zur Deaktivierung der Diapause erforderlich ist.

Abbildung 4.2.4. Schematische Darstellung zur Erläuterung der spezifischen Terminologie im Zusammenhang mit der Ruhe von Artemia-Embryonen.

Tabelle 4.2.1. Einfluss der Kühllagerung bei unterschiedlichen Temperaturen auf die Schlüpfbarkeit von lagergetrockneten Artemia-Zysten aus Kasachstan


Einführung in Anaerobier

Anaerobe Bakterien unterscheiden sich in ihrer Pathogenität. Es wird angenommen, dass nicht alle von ihnen klinisch signifikant sind, während andere als hochpathogen bekannt sind. Tabelle 1 listet die wichtigsten Anaerobier auf, die klinisch am häufigsten vorkommen. Die Taxonomie anaerober Bakterien hat sich in den letzten Jahren aufgrund ihrer verbesserten Charakterisierung durch genetische Studien verändert (1). Die Fähigkeit, zwischen ähnlichen Stämmen zu unterscheiden, ermöglicht eine bessere Charakterisierung des Infektionstyps und der vorhergesagten antimikrobiellen Empfindlichkeit. Die am häufigsten aus klinischen Infektionen isolierten Anaerobier-Arten sind mit abnehmender Häufigkeit: die klinisch bedeutsamen Anaerobier sind gramnegative Stäbchen (Bacteroides, Prevotella, Porphyromonas, Fusobacterium, Bilophila und Sutterella), grampositive Kokken (hauptsächlich Peptostreptococcus), gram- positive sporenbildende (Clostridium) und nicht sporenbildende Bazillen (Actinomyces, Propionibacterium, Eubacterium, Lactobacillus und Bifidobacterium) und gramnegative Kokken (hauptsächlich Veillonella) (2). Etwa 95 % der aus klinischen Infektionen isolierten Anaerobier gehören zu diesen Gattungen. Die verbleibenden Isolate gehören zu noch nicht beschriebenen Arten, die aber meist anhand von morphologischen Merkmalen und Fermentationsprodukten der entsprechenden Gattung zugeordnet werden können. Die Häufigkeit der Wiederfindung der verschiedenen anaeroben Stämme unterscheidet sich an verschiedenen Infektionsherden. Die 12-jährige Erfahrung mit der Gewinnung anaerober Bakterien bei Erwachsenen und Kindern in zwei medizinischen Zentren ist in Tabelle 2 (3) dargestellt. Die Hauptisolate waren anaerobe gramnegative Bazillen (Bakteroide, Prevotella und Porphyromonas 43% der anaeroben Isolate), anaerobe grampositive Kokken (26%), Clostridium spp. (7%) und Fusobacterium spp. (5%). In diesem Kapitel werden die wichtigsten anaeroben Arten und ihre Rolle bei infektiösen Prozessen diskutiert.

KLASSIFIZIERUNG VON ANAEROBEN

Anaerobier vermehren sich nicht in Sauerstoff, haben aber eine unterschiedliche Anfälligkeit für Sauerstoff. Die meisten Anaerobier mit normaler Flora sind extrem sauerstoffempfindlich, während diejenigen, die Infektionen verursachen, aerotoleranter sind. Die Aerotoleranz einiger Anaerobier beruht auf der Produktion von Superoxid-Dismutase, die sie bei Sauerstoffexposition produzieren. Das negative Oxidations-Reduktions-Potential (Eh) der Umwelt ist ein kritischer Faktor für das Überleben anaerober Bakterien.

Anaerobier wachsen nicht auf festen Medien in Raumluft (10% CO2, 18% 02) fakultative Anaerobier wachsen sowohl in An- als auch in Abwesenheit von Luft und mikroaerophile Bakterien wachsen schlecht oder gar nicht aerob, aber besser unter 10% CO2 oder anaerob . Anaerobier werden unterteilt in "strenge Anaerobier", die in Gegenwart von mehr als 0,5% 02 nicht wachsen können, oder "moderate Anaerobier", die in der Lage sind, zwischen 2% und 8% 02 zu wachsen.

GRAM-POSITIVE SPORE-BILDENDE BACILLI

Anaerobe sporenbildende Bazillen gehören zur Gattung Clostridium. Morphologisch sind die Clostridien stark pleomorph, reichen von kurzen, dicken Bazillen bis hin zu langen filamentösen Formen und sind entweder gerade oder leicht gekrümmt. Die bei klinischen Infektionen am häufigsten vorkommenden Clostridien sind Clostridium perfringens (Abb. 1), Clostridium septicum, Clostridium butyricum, Clostridium sordellii, Clostridium ramosum und Clostridium innocuum.

C. perfringens ist ein Bewohner des Bodens und des Darminhalts von Mensch und Tier und ist die am häufigsten vorkommende histotoxische Clostridienart (4). Dieser Mikroorganismus, der

TABELLE 1 Anaerobe Bakterien, die am häufigsten in klinischen Probenorganismen angetroffen werden

Gram-positive Kokken Peptostreptococcus spp. Mikroaerophile Streptokokken3 Gram-positive Bazillen Nicht sporenbildende Actinomyces spp.

Propionibacterium acnes Bifidobacterium spp. Sporenbildende Clostridium spp. C. perfringens C. septicum C. sordellii C. difficile C. botulinum C. tetani Gram-negative Bazillen Bacteroides fragilis-Gruppe (B. fragilis,

B. thetaiotamicron) Pigmental Prevotella und Porphyromonas spp. Prevotella oralis Prevotella B. oris-buccae P. bivia, P. disiens Fusobacterium spp. F. nucleatum F. necrophorum

Atemwege, intraabdominale und subkutane Infektionen Sinusitis, Hirnabszesse

Intrakranielle Abszesse, chronische Mastoiditis, Aspirationspneumonie, Kopf-Hals-Infektionen Shunt-Infektionen (Herz, intrakraniell) Chronische Mittelohrentzündung, zervikale Lymphadenitis

Wunden und Abszesse, Sepsis Sepsis

Nekrotisierende Infektionen Durchfallerkrankungen, Kolitis Botulismus Tetanus

Intraabdominale und weibliche Genitaltraktinfektionen, Sepsis, Neugeboreneninfektion Orofaziale Infektionen, Aspirationspneumonie, Parodontitis Orofaziale Infektionen

Orofaziale Infektionen, intraabdominale Infektionen Infektionen des weiblichen Genitaltrakts

Mund-, Gesichts- und Atemwegsinfektionen, Hirnabszesse, Bakteriämie Aspirationspneumonie, Bakteriämie

entwickelt eine Reihe von nekrotisierenden extrazellulären Toxinen, kann im klinischen Labor leicht isoliert und identifiziert werden. C. perfringens produziert in vivo selten Sporen. Sie kann in direkten Ausstrichen eines eitrigen Exsudats durch das Vorhandensein von dicken, gramvariablen Stäbchen unterschiedlicher Länge, die häufig von einer Kapsel umgeben sind, charakterisiert werden. C. perfringens kann eine verheerende Krankheit mit hoher Sterblichkeit verursachen. Clostridienbakteriämie ist mit ausgedehnter Gewebenekrose, hämolytischer Anämie und Nierenversagen verbunden. Die Inzidenz der Clostridien-Endometritis, ein häufiges Ereignis nach septischen Aborten, hat mit der Zunahme ärztlich überwachter Abtreibungen abgenommen (2).

C. perfringens machte 48 % aller Clostridien-Isolate in unseren Krankenhäusern aus (Tabelle 2) und wurde hauptsächlich aus Wunden (26 % von C. perfringens) Isolaten, Blut (16 %), Abdomen (14 %) sowie geburtshilflichen und gynäkologischen Isolaten isoliert Infektionen (13%).

C. septicum, seit langem als Tierpathogen bekannt, wurde im letzten Jahrzehnt beim Menschen gefunden, oft in Verbindung mit Malignität. Der Darmtrakt gilt als Quelle des Organismus, und die meisten Isolate werden aus dem Blut gewonnen.

C. sordellii verursacht lebensbedrohliche Infektionen nach Traumata, Geburten, gynäkologischen Eingriffen, medizinisch induzierten Abtreibungen, Operationen und Injektionen von auslösenden Medikamenten. Sie kann bei etwa 3/4 der Patienten zu rasch fortschreitender Gewebsnekrose, Schock, Multiorganversagen und Tod führen (4a).

Obwohl Clostridium botulinum in der Regel mit Lebensmittelvergiftungen in Verbindung gebracht wird, werden Wundinfektionen durch diesen Erreger immer häufiger erkannt. Bei Wundinfektionen wurden proteolytische Stämme der Typen A und B berichtet. Eine durch C. botulinum verursachte Krankheit ist normalerweise eine Vergiftung, die durch die Einnahme kontaminierter Lebensmittel (ungesgartes Fleisch, schlecht verarbeiteter Fisch, unsachgemäß konserviertes Gemüse) verursacht wird, die ein hochpotentes Neurotoxin enthalten. Solche Lebensmittel scheinen nicht unbedingt verdorben zu sein, und es kann auch keine Gasproduktion erkennbar sein. Das Polypeptidneurotoxin ist relativ hitzelabil, und Nahrungsmittel, die dieses Toxin enthalten, können unschädlich gemacht werden, indem sie 10 Minuten lang 100ºC ausgesetzt werden.

TABELLE 2 Prozentsatz der Wiederfindung von Anaerobiern an jedem Infektionsort in den medizinischen und Marinemedizinischen Zentren der Walter Reed-Armee 1973-1985

Gesamtzahl anaerober

Probenanzahl anaerober Isolate/ Bacteroides Fusobac- Clostridium Lactobacillus Eubacterium Propionibac- Bilidobac- Actinomyces Veillonella Peptostrepto-

Quellexemplare Isoliert Exemplare spp. /erfi/mspp. spp. spp. spp. /em/mspp. /em/mspp. spp. spp. coccj/sspp.

a In Klammern: Prozentsatz aller anaeroben Bakterien, die aus der angegebenen Quelle isoliert wurden. Quelle: Aus Ref.-Nr. 3.

ABBILDUNG 1 Gramfärbung von Clostridium per-fringens.

C. botulinum wird normalerweise mit einer Lebensmittelvergiftung in Verbindung gebracht (2) Botulismus ist eine Vergiftung, die durch die Aufnahme kontaminierter Lebensmittel mit seinem hochpotenten Neurotoxin verursacht wird. Es wird jedoch immer häufiger über Wundinfektionen berichtet, die durch proteolytische Stämme der Typen A und B verursacht werden und auch Botulismus hervorrufen können.

C. botulinum wurde auch mit Neugeborenen in Verbindung gebracht, die sich mit Hypotonie, Atemstillstand, Areflexie, Ptosis und schlecht reagierenden Pupillen vorstellten. Botulismus bei Säuglingen wird durch Toxine aus der Keimung von aufgenommenen Sporen und C. botulinum im Darmlumen verursacht. C. butyricum kann auch durch Infektionen des Abdomens, Abszesse, Galle, Wunden und Blut gewonnen werden.

Clostridium difficile wird als Erreger von Antibiotika-assoziierten und spontanen Durchfällen und Kolitis inkriminiert (5). Ein früher selten isolierter Stamm von C. difficile, bekannt als BI/NAP1, wurde kürzlich mit geografisch unterschiedlichen Ausbrüchen von C. difficile-assoziierten Erkrankungen in Verbindung gebracht, die schwere klinische Symptome und schlechte Ergebnisse aufweisen (5).

Clostridium tetani wird selten aus menschlichem Kot isoliert. Infektionen, die durch diesen Bazillus verursacht werden, sind das Ergebnis einer Kontamination von Wunden mit Erde, die C. tetani-Sporen enthält. Die Sporen keimen in devitalisiertem Gewebe und produzieren das Neurotoxin, das für die klinischen Befunde von Tetanus verantwortlich ist. C. tetani wurde bei Patienten mit otogenem Tetanus nachgewiesen (6).

Clostridien können von verschiedenen Infektionsstellen isoliert werden. Diese Organismen kommen besonders häufig bei Abszessen (meist Bauch, Rektum und Oropharyngeal) und Peritonitis vor (1). Die Verbreitung von Clostridien bei diesen Infektionen wird durch ihre Prävalenz in der normalen Magen-Darm- und Zervikalflora erklärt, von der sie stammen können (7).

Clostridien-Stämme (C. perfringens, C. butyricum und C. difficile) wurden aus Blut- und Peritonealkulturen nekrotisierender Enterokolitis und von Säuglingen mit plötzlichem Todessyndrom gefunden (8-10). Clostridium-Stämme wurden von Kindern mit Bakteriämie gastrointestinalen Ursprungs (11) und mit Sichelzellanämie (12) gewonnen. Clostridienstämme wurden aus Proben von Patienten mit akuter (13) und chronischer (14) Otitis media, chronischer Sinusitis und Mastoiditis (15,16), Peritonsillarabszessen (17), Peritonitis (18,19), Leber- und Milzabszessen gewonnen (20), Bauchabszesse (21) und neonatale Konjunktivitis (22, 23).

GRAM-POSITIVE NICHT-SPORE-BILDENDE BACILLI

Anaerobe, grampositive, nicht sporenbildende Stäbchen umfassen einen Teil der Mikroflora der Zahnfleischspalten, des Magen-Darm-Trakts, der Vagina und der Haut. Da viele von ihnen morphologisch ähnlich zu sein scheinen, waren sie durch die üblichen bakteriologischen Tests schwer zu trennen. Mehrere verschiedene Gattungen werden erkannt: Actinomyces, Arachnid, Bifidobacterium, Eubacterium, Lactobacillus und Propionibacterium.

Die Actinomyces, Arachnia und Bifidobacterium der Familie Actinomycetaceae sind grampositive, pleomorphe, anaerobe bis mikroaerophile Bazillen. Arten der Gattung Bifidobacterium sind Bestandteil der kommensalen Flora des Mund-Gastrointestinaltrakts und des weiblichen Genitaltrakts und stellen einen hohen Anteil der normalen Darmflora des Menschen, insbesondere bei gestillten Säuglingen (24). Obwohl über einige Infektionen durch diese Organismen berichtet wurde (25-28), ist über ihr pathogenes Potenzial nur wenig bekannt.

Eubacterium spp. gehören zur Mund- und Darmflora. Sie wurden als Krankheitserreger bei chronischer Parodontitis (29) und bei Infektionen im Zusammenhang mit Intrauterinpessaren (30) erkannt und wurden bei Patienten mit malignen Bakteriämie (31) und bei Infektionen des weiblichen Genitaltrakts (32) isoliert. Lactobacillus spp. sind allgegenwärtige Bewohner der menschlichen Mundhöhle, der Vagina und des Magen-Darm-Trakts (33). Sie wurden mit verschiedenen schwerwiegenden tiefsitzenden Infektionen, Amnionitis (33) und Bakteriämie (34) in Verbindung gebracht.Eubacterium, Lactobacillus und Bifidobacterium spp. wurden nur in wenigen Fällen in Reinkultur isoliert und werden in der Regel in Mischkultur aus klinischen Proben isoliert (1). Die am häufigsten gefundenen Infektionen sind chronische Mittelohrentzündung und Sinusitis, Aspirationspneumonie sowie intraabdominale, geburtshilfliche und gynäkologische sowie Haut- und Weichteilinfektionen (1,35,36).

Actinomyces israelii und Actinomyces naeslundii sind normale Bewohner des menschlichen Mund- und Rachenraums (insbesondere Gingivakrypten, Zahnstein und Tonsillenkrypten) und sind die am häufigsten isolierten pathogenen Aktinomyceten. Diese Organismen wurden aus intrakraniellen Abszessen (37), chronischer Mastoiditis (16), Aspirationspneumonie (38) und Peritonitis (18) gewonnen. Obwohl Actinomyceten häufig in Mischkulturen vorkommen, sind sie selbst eindeutig pathogen und können überall im Körper weit verbreitete verheerende Krankheiten hervorrufen (39). Die Läsionen der Aktinomykose treten am häufigsten in den Geweben von Gesicht und Hals, Lunge, Pleura und Ileozökalregionen auf. Knochen-, Perikard- und anorektale Läsionen sind seltener, aber praktisch jedes Gewebe kann befallen werden, eine disseminierte, bakteriämische Form wurde beschrieben.

Propionibacterium spp. sind Teil der normalen Bakterienflora, die die Haut (40), die Bindehaut (41), den Oropharynx und den Magen-Darm-Trakt (42) besiedeln. Diese nicht sporenbildenden, anaeroben, grampositiven Bazillen sind häufige Kontaminanten von Blutproben und anderen sterilen Körperflüssigkeiten und es wird allgemein angenommen, dass sie beim Menschen keine oder nur eine geringe pathogene Rolle spielen.

Propionibacterium acnes und andere Propionibacterium spp. wurden jedoch mit oder ohne andere aerobe oder anaerobe Organismen als ätiologische Erreger mehrerer Infektionsherde gefunden (43-54). Dazu gehören Konjunktivitis (43), intrakranielle Abszesse (44, 45), Peritonitis (46) und Zahn-, Parotis- (47, 48), Lungen- (47, 48) und andere schwere Infektionen (49). Sie wurden oft als einziges Isolat in Proben von Patienten mit Infektionen im Zusammenhang mit einem Fremdkörper (wie einer künstlichen Klappe), Endokarditis (50,51) und Shunt-Infektionen des zentralen Nervensystems (50,52) gefunden. Die mögliche Rolle von P. acnes bei der Pathogenese der Akne vulgaris wurde vorgeschlagen. Die Daten, die dies stützen, basieren auf der Rückgewinnung dieses Organismus in großer Zahl aus Talgdrüsenfollikeln, insbesondere bei Patienten mit Akne, auf seiner Fähigkeit, Enzyme wie Lipase, Protease und Hyaluronidase herzustellen, und auf seiner Fähigkeit, das Komplementsystem zu aktivieren und die chemotaktische Aktivität von Neutrophilen zu erhöhen (53).

GRAM-NEGATIVE BACILLI

Die anaeroben gramnegativen Stäbchen werden anhand der von ihnen produzierten Fermentationssäuren in Gattungen eingeteilt. Die Familie Bacteroidaceae enthält mehrere Gattungen von medizinischer Bedeutung: Bacteroides fragilis-Gruppe, Prevotella, Porphyromonas, Bacteroides und Fusobacterium.


15.1.1: Grampositive Stäbchen - Biologie

Chorioamnionitis durch Arcanobacterium haemolyticum

Sahira Haneefa, Resmi Rajan, Ramani Bai Joseph Theodore, Arya Raveendran Vasantha
Institut für Mikrobiologie, Govt. Medical College, Thiruvananthapuram, Kerala, Indien

Datum der Web-Veröffentlichung3-August-2013

Postadresse:
Sahira Haneefa
Institut für Mikrobiologie, Govt. Medizinische Hochschule, Thiruvananthapuram, Kerala
Indien

Quelle der Unterstützung: Keiner, Interessenkonflikt: Keiner

DOI: 10.4103/0972-1282.116086

Chorioamnionitis kann entweder durch das Aufsteigen von Organismen aus der Vagina nach einem Blasensprung oder über die Blutbahn entstehen. Dieser Bericht beschreibt einen Fall von Chorioamnionitis verursacht durch Arcanobacterium haemolyticum, ein ungewöhnlicher Erreger der Chorioamnionitis. Dies ist ein Fall einer 22-jährigen zweiten Gravida, die in der 34. Schwangerschaftswoche wegen Polyhydramnion zur sicheren Entbindung eingeliefert wurde. Es wurde intermittierend ein gelblicher, übelriechender Ausfluss festgestellt. A. haemolyticum wurde aus Fruchtwasser isoliert. Chorioamnionitis kann zu erheblicher mütterlicher und fetaler Mortalität und Morbidität führen. Daher ist es wichtig, bei Verdachtsfällen eine zeitnahe Diagnose und Behandlung sicherzustellen.

Schlüsselwörter: Arcanobacterium haemolyticum , Chorioamnionitis, vorzeitiger Blasensprung


So zitieren Sie diesen Artikel:
Haneefa S, Rajan R, Theodore RB, Vasantha AR. Chorioamnionitis durch Arcanobacterium haemolyticum. J Acad Clin Microbiol 201315:34-5

So zitieren Sie diese URL:
Haneefa S, Rajan R, Theodore RB, Vasantha AR. Chorioamnionitis durch Arcanobacterium haemolyticum. J Acad Clin Microbiol [seriell online] 2013 [zitiert am 1. Juli 2021]15:34-5. Verfügbar unter: https://www.jacmjournal.org/text.asp?2013/15/1/34/116086

Chorioamnionitis ist eine Infektion von zwei Membranen der Plazenta (dem Chorion und dem Amnion) und dem Fruchtwasser, das das Baby umgibt. [1]

Arcanobacterium haemolyticum, einem aeroben, langsam wachsenden, Katalase-negativen grampositiven Bazillus, wurde als seltene Ursache von Peritonsillarabszess, Pharyngitis und Mandelentzündung bei Kindern und jungen Erwachsenen berichtet.

Risikofaktoren für die Entwicklung dieser Infektion müssen noch identifiziert werden. Es ist häufig ein Bestandteil einer polymikrobiellen Infektion. [2] Der Organismus wurde außerdem von Patienten mit chronischen Hautgeschwüren, Weichteilinfektionen, tiefen Gewebeabszessen, Meningitis, Lungenentzündung, Endokarditis und Bakteriämie isoliert.

Eine 22-jährige zweite Gravida in der 34. Schwangerschaftswoche wurde wegen Polyhydramnion zur sicheren Entbindung aufgenommen. Nach 2 Tagen Aufnahme hatte die Patientin nach einer vaginalen Untersuchung Wehenschmerzen und einen Blasensprung. Der Ausfluss war gelblich und roch übel. Fetale Bewegungen wurden von der Patientin gut wahrgenommen. Bei der Untersuchung war die Patientin afebril mit Uterusempfindlichkeit, die Herzfrequenz betrug 100/min und der Blutdruck betrug 120/80. Ultraschall zeigte Polyhydramnion. Die Hämoglobin- und Gesamtleukozytenzahl betrug zum Zeitpunkt der Aufnahme 9,0 bzw. 10.000. Alle anderen Routineuntersuchungen (Blutzucker, Serumelektrolyte, Harnstoff und Kreatinin lagen im Normbereich). Die Fruchtwasser-, Blut- und Urinproben wurden gesammelt und zur Kultur und Sensibilisierung geschickt. In der ersten Schwangerschaft verlief die vorgeburtliche Periode ereignislos, aber das Baby starb mit 2 Monaten aufgrund einer Sepsis.

Chorioamnionitis kann entweder durch das Aufsteigen von Organismen aus der Vagina nach einem Blasensprung oder über den Blutkreislauf entstehen. Häufig wurden Anaerobier und Streptokokken der Gruppe B als Ursache von Chorioamnionitis berichtet. [3] Die Diagnose einer klinischen Chorioamnionitis wird durch das Vorhandensein von Fieber bei einem trächtigen Patienten ohne Anzeichen einer Infektion oder eines anderen Infektionsherdes nahegelegt. Gebrochene Membranen können vorhanden sein oder nicht. Der infektiöse Organismus kann nicht in allen Fällen aus dem Fruchtwasser isoliert werden. [4] Die bakterielle Zusammensetzung des Fruchtwassers bei geplatzten Membranen ist oft polymikrobiell. Aber in diesem Fall wurde nur eine Art von Organismus isoliert.

A. hemolyticum ist ein grampositives Stäbchen mit körnigem oder perlenförmigem Aussehen. Kolonien sind auf Blutagar beta-hämolytisch und auf der Gram-Färbung sind unregelmäßige keulenförmige Stäbchen zu erkennen. [5] Gattung Arkanobakterien umfasst sechs Arten A. hemolyticum, A. pyogenes, A. bernardiae, A. phocae, A. pluranimalium, und A. hippocoleae. Dieser Organismus war empfindlich gegenüber Penicillin, Cephalosporinen, Erythromycin und Azithromycin. Makrolide wurden als Mittel der Wahl vorgeschlagen, da über ein Versagen der Behandlung mit Betalaktum-Antibiotika berichtet wurde. [6]


Gomoris Trichromie

Ein bakterielles Färbeverfahren unter Verwendung von Kristallviolett- und rosa Safranin-Gegenfärbung, das Bakterien im Allgemeinen entweder in gram-positiv oder gram-negativ unterteilt und für die Berücksichtigung der damit verbundenen Pharmakologie nützlich ist. Das Verfahren wurde nach Hans Christian Gram (1853 - 1938) benannt.

Gram-positive Bakterien

  • Purpurroter Kristallviolettfleck wird von einer Peptidoglycanschicht eingeschlossen.
    • Peptidoglycan bildet die äußere Schicht der Zelle.

    Gram-negative Bakterien

    • Die äußere Membran verhindert, dass die Färbung die Peptidoglycanschicht im Periplasma erreicht.
      • Die äußere Membran besteht aus vier Hauptkomponenten: Lipopolysaccharid, Phospholipiden, Beta-Fass-Proteinen und Lipoproteinen.


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