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22A: Identifizierung von Staphylococcus-Arten – Biologie

22A: Identifizierung von Staphylococcus-Arten – Biologie


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Ziele

  • Machen Sie sich mit der Artbildung der Gattung vertraut Staphylokokken.
  • Züchten und identifizieren Sie verschiedene Staphylokokken-Spezies mit selektivem und differentiellem Agar
  • Identifizieren Sie die 3 hämolytischen Typen auf Blutagar.

Staphylokokken ist eine Gattung von Gram +, nichtsporenbildende Kokken, die zur Familie gehören Mikrokokkengewächse die oft als normale menschliche Mikrobiota der Haut und Nasenhöhle gefunden werden. Es gibt fünf Organismen, die als potenzielle menschliche Krankheitserreger in dieser Gattung in Betracht gezogen werden: S. aureus, S. epidermidis, S. saprophiticus, S. haemolyticus, und S. hominis aber die ersten drei sind die häufigsten Isolate. S. aureus wird oft als der problematischste der drei Krankheitserreger angesehen und unterscheidet sich von den anderen beiden dadurch, dass er als einziger in der Lage ist, Plasma zu koagulieren. S. aureusis kann viele oberflächliche pyogene (eitrige) Infektionen der Dermis und des darunter liegenden Gewebes sowie schwere systemische Infektionen verursachen. Es kann eine Reihe von Toxinen produzieren, darunter Enterotoxine (Lebensmittelvergiftung), Zytotoxine (allgemeine systemische Toxine) und toxische Schock-Superantigene. Die andere Koagulase-negativ Staphylokokken (S. epidermidis und S. saprophiticus) werden als Krankheitserreger deutlich seltener gefunden, werden aber gelegentlich mit Endokarditis, Gelenkprotheseninfektionen und Wundinfektionen in Verbindung gebracht, um nur einige zu nennen.

Diese Übung gibt Ihnen die Möglichkeit, selektiv Medien, in diesem Fall auf Basis von hohem Natriumchloridgehalt (MSA und SM1 10 sind beide selektive Medien zur Isolierung von Staphylokokken- 7,5% NaCl). Ein selektives Medium hat einen Hemmstoff, der das Wachstum bestimmter Bakterien begünstigt, indem er andere hemmt. MSA enthält einen zusätzlichen Indikator zur Überwachung der Mannit-Fermentation, was es zu einem Differential auch Medien. Von den Bakterien, die in Gegenwart eines hohen NaCl-Gehalts wachsen können, sind einige halophil (erfordern eine bestimmte Salzkonzentration, um zu wachsen), während andere halodurisch sind (das Salz nicht verwenden, aber vertragen). Staphylokokken nicht halophil, sondern eher halodurisch, da es in hohen NaCl-Konzentrationen leben oder diese ertragen kann. Der hohe Salzgehalt in SM1 10 und MSA hemmt andere häufige Hautmikroorganismen. Die anderen Medien, die in dieser Übung verwendet werden, dienen der Differenzierung von pathogenen Staphylokokken von nicht-pathogenen, und zur Identifizierung der Spezies.

Nicht nur salzbeständig, Staphylokokken ist immer fakultativ anaerob. Wenn es gefärbt ist, ist es in kleinen Clustern (Staphylo = Cluster) zu sehen. Staphylokokken ist normalerweise entweder beta-hämolytisch oder überhaupt nicht hämolytisch (sogenannte Gamma-Hämolyse). Pathogen Staphylokokken kann eine Vielzahl von Virulenzfaktoren produzieren, darunter Toxine, Koagulase, Leukozidine und hydrolytische Enzyme, die das Wirtsgewebe schädigen können.

Blutagar (BAP) wird mit 5% Schafblut hergestellt. Es ist ein gebräuchliches Medium zur Kultivierung von Bakterien, weil:

  1. Es ist ein großartiges Anreicherungsmedium für anspruchsvoll Bakterien.
  2. Die Hämolyse von Blutzellen kann als Identifizierungstest sehr nützlich sein.

CNA-Agar ist eine Art von Blutagar. Der einzige Unterschied besteht darin, dass CNA eine Antibiotikum, Naladixinsäure, die Gram-Bakterien hemmt.

Hämolyse ist der Abbau von roten Blutkörperchen. Hämolysine sind Enzyme, die von einigen Bakterien produziert werden und in das Medium um die Bakterienkolonie freigesetzt werden. Es kann zu einem vollständigen Zusammenbruch der Zellen mit Freisetzung von Hämoglobin und einer Entfernung des Rots aus dem umgebenden Medium um die Kolonie kommen. Oder die Hämolyse kann ein teilweiser Zusammenbruch sein, was zu einer grünlichen oder grün-gelben Zone um die Kolonie herum führt.

BENÖTIGTE MATERIALIEN: pro Tisch

  • Sterile Tupfer
  • Sterile Kochsalzlösung
  • 1 Mannit-Salz-Agar (MSA)-Platten
  • Behälter mit Alkohol + Pinzette
  • 1 Columbia-Naladixinsäure-Blutagarplatte (CNA)
  • 1 Staphylococcus Medium 110 (SM110) Agarplatte
  • 1 DNase-Agarplatten
  • Novobiocin (5 Mikrogramm) Antibiotika-Blättchen
  • Metrische Lineale
  • Kaninchenplasma (gefroren) für den Koagulase-Test
  • Andere Medien zur Identifizierung:
    • Arginin- und Ornithin-Decarboxylase-Brühen
    • Harnstoffbrühe
    • ONPG
    • Saccharose, Trehalose, Maltose
    • VP-Brühe
    • Nitratbrühe
    • Thioglykolatbrühe (für anaerobes Wachstum)

SCHEMA DES IDENTIFIZIERUNGSVERFAHRENS

1NS Sitzung  ⇒ 2nd Sitzung  ⇒ 3rd Sitzung  ⇒ 4NS Sitzung

CNA DNAse Coagulase Andere erforderliche Tests durchführen Spezies identifizieren

MSA SM110 ONPG

Katalaseoxidase

Gramm Phenolrote Laktose

Fleckenbrühe

DIE VERFAHREN

Notiz

Führen Sie unbedingt eine Liste mit alle Testergebnisse für deine Isolate.

1NS Sitzung

  1. Jede Tabelle erhält eine Staphylokokken-Spezies, die auf einer NA- oder TSA-Platte wächst.
  2. Verwenden von Isolationsstreifentechnik, die Columbia-Naladixinsäure (CNA) inokulieren und die Novobiocin-Scheibe in Abschnitt 1 platzieren.
  3. Die Empfindlichkeit gegenüber Novobiocin ist ein wichtiges Unterscheidungsmerkmal unter einigen der Staphylokokken Spezies. Legen Sie die Pinzette in den Alkohol und sterilisieren Sie die Pinzette, indem Sie sie schnell durch die Flamme führen. Der Alkohol fängt Feuer und wenn er aus der Pinzette verdunstet, sind sie dann steril. Sie können nun eine Novobiocin-Scheibe aus dem Halter entnehmen und auf die CNA-Platte legen – im ERSTER Streak-Abschnitt (wo es zu einem konfluenten Wachstum des Bakteriums kommt).
  4. Für die anderen Agarplatten – SM 110-Platte, Mannitol-Salz-Agar (MSA)-Platte, DNAse-Agar-Platte – reicht eine Impflinie in der Mitte der Platte für die Wachstumsergebnisse aus.
  5. Medien bei 37 °C inkubieren.
  6. Führen Sie Oxidase- und Katalase-Tests auf Plattenkulturen durch.
  7. Gramfärbung des Isolats, um Form und Anordnung sowie Gramreaktion zu erhalten.
  8. Wir werden den ONPG-Test in der nächsten Sitzung durchführen. Dieser Test erfordert das Einschalten einer Reihe von Genen, des lac-Operons. Um diese Aktivität zu induzieren, muss das Bakterium Laktose ausgesetzt werden. Deshalb impfen Sie auch eine Tube Phenolrot-Laktosebrühe.

2nd Sitzung

  1. Gehen Sie zu den einzelnen Laborübungen, um den Mannitsalz- und DNAse-Test zu interpretieren (erfordert HCl).
  2. Auf der CNA-Platte überprüfen Sie auf 2 Reaktionen --- Empfindlichkeit gegenüber Novobiocin-Antibiotikum UND Hämolyse von Blut.
    1. Novobiocin-Sensitivität - Eine Zone von 17 mm zeigt Empfindlichkeit an
    2. Hämolytische Reaktionen:
      • Alpha (α)-Hämolyse – grüner Bereich um die Kolonie, verursacht durch austretendes Hämoglobin, das in Biliverdin umgewandelt wird, sogenannte partielle Hämolyse
      • Beta(β)-Hämolyse – vollständige Klärung um die Kolonie, verursacht durch den Abbau von Erythrozyten durch Streptolysin-Enzyme
      • Gamma (γ) Hämolyse - keine Hämolysine, keine Zone
        • Staphylokokken Arten sind entweder Beta-hämolytisch oder Gamma (nicht hämolytisch). Staph aureus produziert Alpha-Toxin, das typischerweise weite Bereiche der Beta-(vollständigen) Hämolyse verursacht.
  3. Überprüfen Sie die SM 110 auf Wachstum und Pigmentierung. Nährstoffe und Vitamine in diesem Medium fördern die Pigmentierung der Krankheitserreger Staphylokokken, diese Kolonien werden zu einer gelb-orange Kolonie.
  4. Führen Sie den Koagulase-Test durch: Für diesen Test gibt es eine verknüpfte Übung. Es gibt nur wenige Arten von Staphylokokken die im Koagulase-Test positiv sind (siehe Tabelle unten) und S. aureus ist am häufigsten. Da es zwei Arten von Koagulase-Enzymen gibt – gebunden und frei – gibt es zwei verschiedene Tests, die verwendet werden können, um diese Enzyme zu identifizieren. Die ROHR Methode ist der definitive Test der 2, die zuverlässigste. Die Koagulase-Testübung im Laborhandbuch beschreibt diese 2 Versionen klar.
  5. Die ONPG Testlauf durchgeführt wird. Sehen Sie in Ihren Laborübungen für diesen Test nach, wie Sie den Test durchführen. Da sich in der Tube nur sehr wenig Flüssigkeit befindet, sollten Sie die Oberseite der Tube mit Parafilm abdecken und dann die Tube-Oberseite darüber platzieren. Dies reduziert die Austrocknung.

3rd Sitzung

  1. Die wichtigste Testreaktion zur Verwendung in Staphylokokken Identifizierung ist die Koagulase-Testreaktion, die die Gattung teilt Staphylokokken in 2 Gruppen – Koagulase-negative Spezies und Koagulase-positive Spezies. Welche Testmedien Sie zur Identifizierung verwenden, hängt davon ab, in welche Kategorie Ihr Organismus fällt. Möglicherweise möchten Sie einige der folgenden Tests durchführen.
  • Verfügbare Medien:
    • Arginin und Ornithin
    • Decarboxylasebrühen
    • Harnstoffbrühe
    • ONPG
    • Saccharose, Trehalose, Maltose-Zucker
    • VP-Brühe
    • Nitratbrühe
  1. Wenn du eine hast Koagulase positiv Staph, es stehen nur wenige Arten zur Auswahl: Unten finden Sie eine Tabelle mit diesen Arten.
  2. Wenn dein Organismen ist Koagulase-negativ, überprüfen Sie das Flussdiagramm unten sowie das Bergey’s Manual oder andere Identifikationsbücher.
  3. Führen Sie die erforderlichen Tests zur Identifizierung durch. ES LIEGT AN IHNEN ZU BESTIMMEN, WELCHE ZUSÄTZLICHE TESTS FÜR EINE EINDEUTIGE IDENTIFIZIERUNG DURCHGEFÜHRT WERDEN.

4NS Sitzung

  1. Lesen Sie alle Tests der letzten Sitzung (Informationen zu Testinterpretationen finden Sie in den Laborübungen).
  2. Schreiben Sie einen Bericht für Ihren Staphylokokken Artenbestimmung, wenn Ihr Lehrer Sie dazu anweist.
Tabelle 1: Unterscheidung zwischen koagulasepositiven Staphylokokken
RöhrchenkoagulaseSäure aus Trehalose VP-Test ONPG-Test
S. aureus+++-
S. intermedius++-+
S. hyicusVariable+--
S. schleiferi+-+?

Häufig Koagulase negativ Staphylokokken Spezies

Tabelle 2: Differenzierung von S. aureus von anderen üblichen menschlichen Staphylokokken-Normalflora
S. aureus S. epidermidis S. saprophiticus
Alpha-Toxin (ß-Hämolyse) + (die meisten Stämme)--
Wachstum auf 7,5% Salz (Mannitsalz)
Säure aus Mannit +-+ (die meisten Stämme)
Koagulase-Reaktion +--
Pigmentherstellung (SM110) Normalerweise goldenNormalerweise weißNormalerweise weiß
DNase-Produktion + (normalerweise)--
Empfindlichkeit gegenüber Novobiocin empfidlichempfidlichbeständig

* Novobiocin-Sensitivität = >17 mm Zonengröße

FRAGEN

  1. Welche Hämolyse wird häufig mit Pathogenität assoziiert?
  2. Was sind die Unterscheidungsmerkmale der Gattung Staphylokokken?
  3. Können Sie die Testreaktion von S. aureus für jeden der wichtigsten durchgeführten Tests angeben – MSA, SM110, Koagulase, Katalase, Oxidase und DNAse?
  4. Was passiert mit Erythrozyten bei Beta- und Alpha-Hämolyse?

Staphylococcus lugdunensis: Überprüfung der Epidemiologie, Komplikationen und Behandlung

Staphylococcus lugdunensis ist eine Spezies von Koagulase-negativen Staphylokokken (ZNS), die eine Vielzahl von Infektionskrankheiten induziert, darunter Haut- und Weichteilinfektionen (SSTI), infektiöse Endokarditis (IE) sowie Knochen und PJI. Dieser Übersichtsartikel unterstreicht die wichtigen Punkte in der Literatur über S. lugdunensis Infektionen, einschließlich ihrer Epidemiologie, Diagnose und Behandlung, sowie spezifische Arten von Infektionen, die sie verursachen können. Anatomische und altersbedingte Verteilungen von S. lugdunensis SSTIs wurden beobachtet, obwohl sie am häufigsten als Abszesse auftreten. S. lugdunensis kann sich auch als aggressive Form der IE mit Klappenzerstörung und Abszessbildung manifestieren, die häufig operiert werden muss und eine hohe Sterblichkeitsrate aufweist. Knochen- und Gelenkinfektionen durch S. lugdunensis sind auch invasiver als Infektionen durch andere ZNS-Arten. Die klinische Präsentation von S. lugdunensis Infektionen bei SSTI, IE und Knochen-/Gelenkinfektionen sind häufig ähnlicher wie bei S. aureus Infektion als bei anderen ZNS-Infektionen, was eine Differenzierung des ZNS auf Speziesebene für eine korrekte Diagnose erforderlich macht. Obwohl dies in der Vergangenheit von biochemischen Tests abhing, die weder routinemäßig noch zuverlässig waren, hat die Einführung der matrixunterstützten Laserdesorptions-/Ionisationsflugzeit-Massenspektrometrie (MALDI-TOF MS) in klinischen Labors die Identifizierung von ZNS-Spezies wie S. lugdunensis praktischer. Bildgebende Verfahren, insbesondere die Fluordesoxyglukose (FDG) mit Positronen-Emissions-Tomographie (PET), sind ein weiterer wichtiger neuer Trend bei der Diagnose von Infektionskrankheiten wie S. lugdunensis Infektion. S. lugdunensis ist nach wie vor sehr anfällig für eine breite Palette antibakterieller Therapien, was für andere ZNS uncharakteristisch ist. Infektionen können normalerweise mit Antibiotika behandelt werden, die traditionell für das ZNS verwendet werden, wie z. B. Oxacillin. Die Haltepunkte für S. lugdunensis sind höher als die anderer ZNS und ähnlich wie S. aureus Haltepunkte. Bei aggressiver IE oder Knochen-/Gelenkinfektion durch S. lugdunensis, wird eine Behandlung mit einem β-Lactam-Mittel empfohlen. Weitere Studien sind erforderlich, um die Vielfalt, Virulenz und Populationsstruktur dieser Art sowie ihre Rolle bei anderen Infektionen wie Harnwegsinfektionen (HWI), Atemwegsinfektionen, Peritonitis und Bakteriämie zu verstehen.

Schlüsselwörter: Knocheninfektion Koagulase-negative Staphylokokken Infektiöse Endokarditis Haustierprothesen Gelenkinfektion Haut- und Weichteilinfektion Staphylococcus lugdunensis.


Phänotypische und genotypische Charakterisierung mit MALDI-TOF-MS-basierter Identifizierung von Staphylokokken spp. Isoliert von Mobiltelefonen aufgrund ihrer Antibiotika-Empfindlichkeit, Biofilmbildung und Adhäsionseigenschaften

Handys, Smartphones und Tablets werden im gesellschaftlichen und beruflichen Leben intensiv genutzt und sind daher häufig Bakterien ausgesetzt. Das Hauptziel der vorliegenden Arbeit war es, zu isolieren und zu charakterisieren Staphylokokken Belastungen durch das Handy der Schüler. Anschließend 24 Staphylokokken Die Stämme wurden gegen eine Vielzahl von Antibiotika auf die Verteilung einiger virulenzbezogener Gene und ihre Fähigkeit zur Biofilmbildung getestet. Staphylokokken spp. wurden von allen untersuchten Geräten auf chromogenem Medium kultiviert und mit der Matrix-unterstützten Laserdesorption/Ionisation (MALDI), Flugzeit (TOF) Massenspektrometrie (MS) Technik (MALDI-TOF-MS) identifiziert. Die erhaltenen Ergebnisse zeigten, dass S. aureus war die dominierende Art (19 Stämme, 79,1%), gefolgt von S. warneri (3 Stämme, 12,5%) und S. haemolyticus (2 Stämme, 8,3%). Isolierte Stämme zeigten hohe Prozentsätze der Produktion hydrolytischer Enzyme, Resistenz gegen viele getestete Antibiotika und 37,5% exprimierten die mecEIN Gen. Die getesteten Stämme waren stark an Polystyrol und Glas haftend und äußerten sich als beteiligt icaEIN (62,5%) und icaD (66,6%) Gene. Alle Staphylokokken spp. Es wurde festgestellt, dass die getesteten Stämme Proteasen und das &agr;-Hämolysin-Gen besitzen. Unsere Ergebnisse unterstreichen die Bedeutung von Mobiltelefonen als großartige Quelle für Staphylokokken spp., und diese Spezies erwiesen sich als resistent gegen viele Antibiotika mit einem multiplen Antibiotikaresistenzindex (MAR) im Bereich von (0,444) bis (0,812). Die meisten der untersuchten Stämme sind in der Lage, Biofilme zu bilden und exprimieren viele Virulenzgene. Die phylogenetische Analyse auf der Grundlage der phänotypischen und genetischen Merkmale verdeutlichte die phänotypische und genetische Heterogenität der S. aureus Bevölkerung untersucht. Weitere Analysen sind erforderlich, um die Risiken für die menschliche Gesundheit im Zusammenhang mit den identifizierten Staphylokokken Stämme.

Schlüsselwörter: MALDI-TOF-MS MRSA Staphylococcus Antibiotikaresistenz Biofilm Handyvirulenzgene.

Interessenkonflikt-Erklärung

Die Autoren geben keinen Interessenkonflikt an.

Figuren

Verschiedene Morphotypen aus dem Kongo…

Verschiedene Morphotypen auf Kongorot-Agar basierend auf der erhaltenen Farbe. (…

Dendrogramm basierend auf dem ungewichteten…

Dendrogramm basierend auf der ungewichteten Paargruppenmethode der arithmetischen Mittelwerte und Jaccard’s…

Dendrogramm basierend auf dem ungewichteten…

Dendrogramm basierend auf der ungewichteten Paargruppenmethode der arithmetischen Mittelwerte und Jaccard’s…

Dendrogramm basierend auf dem ungewichteten…

Dendrogramm basierend auf der ungewichteten Paargruppenmethode der arithmetischen Mittelwerte und Jaccard’s…


Identifizierung von Staphylokokken spp. durch PCR-Restriktionsfragmentlängen-Polymorphismus-Analyse von dnaJ Gen

FEIGE. 1. (A und B) Agarosegelelektrophorese der Fragmente, die durch XapI-Verdau der PCR-Amplifikationsprodukte von Staphylokokken Referenzstämme (Tabelle 1). Bahnen: 1, S. arlettee 2, S. aureus subsp. anaerob 3, S. aureus subsp. aureus 4, S. auricularis 5, S. capitis subsp. capitis 6, S. capitis subsp. urealyticus 7, S. caprae 8, S. carnosus subsp. carnosus 9, S. carnosus subsp. nutze 10, S. chromogenes 11, S. cohnii subsp. cohnii 12, S. cohnii subsp. urealyticus 13, S. Gewürze 14, S. epidermidis 15, S. equirum subsp. äquorum 16, S. equirum subsp. Bettwäsche 17, S. felis 18, S. fleurettii 19, S. gallinarum 20, S. haemolyticus 21, S. hominis subsp. hominis 22, S. hominis subsp. Novobiosepticus 23, S. hyicus 24, S. intermedius 25, S. kloosii 26, S. lentus 27, S. lugdunensis 28, S. muscae 29, S. nepalensis 30, S. pasturi 31, S. pettenkoferi 32, S. piscifermentans 33, S. pseudintermedius 34, S. saccharolyticus 35, S. saprophyticus subsp. bovis 36, S. saprophyticus subsp. saprophyticus 37, S. schleiferi subsp. Koagulans 38, S. sciuri subsp. carnaticus 39, S. sciuri subsp. Nagetier 40, S. sciuri subsp. sciuri 41, S. simulans 42, S. succinus subsp. casei 43, S. succinus subsp. succinus 44, S. vitulinus 45, S. warneri 46, S. xylosus 47, S. simiae M, DNA-Molekularmassenmarker, 50-bp-Leiter (untere Bande, 50 bp). FEIGE. 2. Agarosegelelektrophorese der Fragmente, die durch Bsp143I-Verdau der PCR-Amplifikationsprodukte von Staphylokokken Referenzstämme (Tabelle 1). Bahnen: 1, S. auricularis 2, S. felis 3, S. caprae 4, S. pasturi 5, S. carnosus subsp. carnosus 6, S. warneri 7, S. cohnii subsp. cohnii, 8, S. epidermidis 9, S. kloosii 10, S. saprophyticus subsp. bovis 11, S. nepalensis 12, S. pettenkoferi M, DNA-Molekularmassenmarker, 50-bp-Leiter (untere Bande, 50 bp). FEIGE. 3 . Agarosegelelektrophorese der Fragmente, die durch XapI-Verdau der PCR-Amplifikationsprodukte aus klinischen Staphylokokken isoliert. Bahnen: 1, S. aureus 2, S. haemolyticus 3, S. cohnii Untersp. urealyticus 4, S. epidermidis 5, S. sciuri 6, S. vitulinus M, DNA-Molekularmassenmarker, 50-bp-Leiter (untere Bande, 50 bp).

Einfache und kostengünstige Methode zur Identifizierung und Speziation von Staphylococcus epidermidis und anderen koagulasenegativen Staphylokokken und deren Validierung durch molekulare Methoden

Koagulase-negative Staphylokokken (CoNS) werden zunehmend als klinisch bedeutsame Speziesgruppe anerkannt, die mehrere opportunistische nosokomiale Infektionen verursachen kann. Es gibt mindestens 47 bekannte Staphylokokken-Arten und um alle diese Arten zu unterscheiden, müssen >40 biochemische Tests durchgeführt werden. Die vorliegende Studie konnte den CoNS-Identifizierungsprozess verfeinern, indem nur fünf Tests verwendet wurden, um S. epidermidis von den anderen zu unterscheiden, und sechs weitere Tests verwendet wurden, um elf weitere klinisch signifikante CoNS-Spezies zu identifizieren. Insgesamt wurden 242 CoNS-Isolate aus Krankenhäusern der Tertiärversorgung gesammelt und in die Studie eingeschlossen. Das fünf biochemische Testschema, das auf der Grundlage einer mathematischen Wahrscheinlichkeit entwickelt wurde, die von einem Computeralgorithmus abgeleitet wurde, umfasste die Fermentation von Mannit, Maltose, Mannose, Trehalose und Novobiocin-Empfindlichkeit, um S. epidermidis von anderen CoNS-Spezies zu unterscheiden. Die übrigen CoNS-Isolate außer S. epidermidis wurden mit Hilfe von sechs zusätzlichen Tests weiter charakterisiert, die weitere elf Arten identifizierten. Spezies-spezifische PCR und 16SrDNA-Sequenzierung wurden verwendet, um das Identifizierungsschema zu bestätigen und zu validieren. Die speziesspezifische PCR- und 16SrDNA-Sequenzierung zeigte eine 100-prozentige Übereinstimmung mit nicht abweichenden phänotypischen Testergebnissen, was darauf hindeutet, dass die fünf ausgewählten Assays hochspezifisch für die Identifizierung von S. epidermidis sind. Zusammenfassend lässt sich sagen, dass in dieser Studie nur 11 Tests verwendet wurden, um die meisten der klinisch signifikanten CoNS zu identifizieren, die Kosten und Zeit reduzieren können. Dieses Schema ist in jedem Labor mit grundlegenden Ressourcen einfach durchzuführen. Die Ergebnisse dieser Studie wurden mit genaueren molekularen Methoden wie PCR und 16S rDNA-Typisierung validiert, um den Nutzen des vorgeschlagenen Schemas zu bestätigen.

Schlüsselwörter: 16S rDNA-Sequenzierung Koagulase-negative Staphylokokken Mathematische Wahrscheinlichkeit Phänotypische Identifizierung Speziesspezifische PCR.


Identifizierung von Staphylococcus spp. mit (GTG)₅-PCR-Fingerabdruck

Eine Gruppe von 212 Typ- und Referenzstämmen, die bei der Tschechischen Sammlung von Mikroorganismen (Brünn, Tschechische Republik) hinterlegt sind und 41 Staphylococcus-Spezies mit 21 Unterarten umfasst, wurde mittels rep-PCR-Fingerprinting mit dem (GTG)₅-Primer charakterisiert, um dieses Verfahren für Identifizierung von Staphylokokken. Alle Stämme waren unter Verwendung des (GTG)₅-Primers typisierbar und erzeugten PCR-Produkte im Bereich von 200 bis 4500 bp. Die numerische Analyse der erhaltenen Fingerabdrücke ergab eine (Unter-)Spezies-spezifische Anhäufung entsprechend der taxonomischen Position der analysierten Stämme. Die taxonomische Position ausgewählter Stämme, die die (Unter-)Spezies repräsentieren, die über mehrere rep-PCR-Cluster verteilt waren, wurde durch die partielle rpoB-Gensequenzierung verifiziert und bestätigt. Staphylococcus caprae, Staphylococcus equorum, Staphylococcus sciuri, Staphylococcus piscifermentans, Staphylococcus xylosus und Staphylococcus saprophyticus zeigten heterogene Fingerabdrücke und jede (Unter-)Art war über mehrere Cluster verteilt. Vertreter der verbleibenden Staphylococcus spp. wurden klar in einzelne (unter-)artspezifische Cluster getrennt. Diese Ergebnisse zeigten, dass rep-PCR mit dem (GTG)₅-Primer eine schnelle und zuverlässige Methode zur Differenzierung und einfachen Identifizierung der Mehrheit von Staphylococcus spp.


Staph (Staphylokokken) Infektion

CA-MRSA-Infektionen haben in den USA seit Mitte der 1990er Jahre dramatisch zugenommen.

Community-assoziierte MRSA-Infektionen betreffen normalerweise die Haut und verursachen bei ansonsten gesunden Menschen Pickel und Furunkel. Infizierte Bereiche können rot, geschwollen, schmerzhaft sein und Eiter oder andere Drainagen aufweisen.

Was ist Staphylokokken? Was Ursachen eine Staphylokokkeninfektion?

Staphylokokken ist eine Gruppe von Bakterien (Mikroben oder Keime), die eine Reihe von Infektionskrankheiten in verschiedenen Geweben des Körpers verursachen können. Staphylokokken ist besser bekannt als staph (ausgesprochen "staff"). Staphylokokken-Erkrankungen können von leicht und ohne Behandlung bis hin zu schweren und potenziell tödlichen Erkrankungen reichen.

Der Name Staphylokokken kommt aus dem Griechischen Staphyle, was eine Weintraube bedeutet, und kokkos, was Beere bedeutet, und so sehen Staphylokokken unter dem Mikroskop aus, wie eine Weintraube oder kleine runde Beeren. (Technisch gesehen handelt es sich um grampositive, fakultativ anaerobe, meist unverkapselte Kokken.)

Über 30 verschiedene Arten von Staphylokokken können den Menschen infizieren, aber die meisten Infektionen werden verursacht durch Staphylococcus aureus. Staphylokokken können normalerweise in der Nase und auf der Haut (und seltener an anderen Stellen) bei etwa 25-30% der gesunden Erwachsenen und bei 25% der Krankenhaus- oder medizinischen Fachkräfte gefunden werden. In den meisten Fällen verursachen die Bakterien keine Krankheit. Ein Schnitt, Abrieb oder eine andere Beschädigung der Haut oder eine andere Verletzung kann es den Bakterien jedoch ermöglichen, die natürlichen Schutzmechanismen des Körpers zu überwinden, was zu einer Infektion führt.

Wer ist gefährdet für Staphylokokkeninfektionen?

Jeder kann eine Staphylokokkeninfektion entwickeln, obwohl bestimmte Personengruppen einem höheren Risiko ausgesetzt sind, darunter Neugeborene, stillende Frauen und Menschen mit chronischen Erkrankungen wie Diabetes, Krebs, Gefäßerkrankungen und Lungenerkrankungen. Injizierende Drogenkonsumenten, Personen mit Hautverletzungen oder -erkrankungen, intravenöse Katheter, chirurgische Einschnitte und Personen mit einem geschwächten Immunsystem aufgrund einer Krankheit oder infolge von immunsupprimierenden Medikamenten haben alle ein erhöhtes Risiko, eine Staphylokokkeninfektion zu entwickeln.

Ist eine Staphylokokkeninfektion ansteckend?

Staphylokokkeninfektionen sind ansteckend, bis die Infektion abgeklungen ist. Direkter Kontakt mit einer infizierten Wunde oder Wunde oder mit Körperpflegemitteln wie Rasierern, Verbänden usw. sind übliche Übertragungswege. Bei gelegentlichem Kontakt wie Küssen oder Umarmen besteht kein großes Übertragungsrisiko, wenn kein direkter Kontakt mit dem infizierten Bereich besteht.

Bestimmte Arten von Staphylokokkeninfektionen (siehe unten) betreffen Staphylokokken, die eine Lebensmittelvergiftung oder ein toxisches Schocksyndrom verursachen. Diese speziellen Staphylokokken verursachen Krankheiten, indem sie ein Toxin produzieren. Das Toxin ist nicht ansteckend, eine Lebensmittelvergiftung kann jedoch Personengruppen betreffen, die die gleichen kontaminierten Lebensmittel zu sich nehmen.

Wie lange ist eine Staphylokokkeninfektion ansteckend?

Eine Staphylokokkeninfektion ist ansteckend, solange die infizierte Person eine aktive (andauernde) Infektion hat.

Was ist die Inkubationszeit für eine Staphylokokkeninfektion?

Viele Staphylokokkeninfektionen entstehen durch Bakterien, die bereits natürlich auf der Haut und/oder den Schleimhäuten des Individuums vorhanden sind. Es gibt also keine echte Inkubationszeit für diese Fälle. Bei Staphylokokkeninfektionen, die von einer anderen Person stammen, beträgt die Inkubationszeit jedoch normalerweise etwa vier bis zehn Tage.

Was sind die Symptome und Anzeichen einer Staphylokokkeninfektion?

Eine Staphylokokken-Erkrankung der Haut führt normalerweise zu einer lokalisierten Eiteransammlung, die als Abszess, Furunkel oder Furunkel bekannt ist, abhängig von der genauen Art der vorhandenen Läsion. Zu den Symptomen einer Staphylokokkeninfektion kann ein Hautbereich gehören, der

Drainage oder Eiter sind üblich. Wenn Staphylokokken im Blut sind (Bakteriämie oder Sepsis), kann dies hohes Fieber, Schüttelfrost und niedrigen Blutdruck verursachen.

DIASHOW

Welche Arten von Krankheiten werden durch Staphylokokken verursacht? Welche verschiedenen Arten von Staphylokokkeninfektionen gibt es?

Hautinfektionen (siehe oben) sind die häufigste Art von Krankheit, die durch Staphylokokken. Staphylokokkeninfektionen der Haut können zu Impetigo (eine Verkrustung der Haut) oder Cellulitis (Entzündung der tieferen Hautschichten und des Bindegewebes unter der Haut, die zu Schwellungen und Rötungen des Bereichs führt) fortschreiten. In seltenen Situationen kann sich eine schwerwiegende Komplikation entwickeln, die als Verbrühungssyndrom (siehe unten) bekannt ist. Bei stillenden Frauen kann Staphylokokken zu Mastitis (Entzündung der Brust) oder zu einem Abszess der Brust führen. Staphylokokken-Brustabszesse können Bakterien in die Muttermilch freisetzen.

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Welche Arten von Krankheiten werden durch Staphylokokken verursacht? (Fortsetzung)

Wenn die Bakterien in den Blutkreislauf gelangen und sich auf andere Organe ausbreiten, können eine Reihe schwerwiegender Infektionen auftreten. Die Ausbreitung der Organismen in den Blutkreislauf wird als Bakteriämie oder Sepsis bezeichnet. Wenn Staphylokokken im Blut vorhanden sind (Infektion des Blutkreislaufs), wird der Zustand als Staphylokokken-Bakteriämie bezeichnet. Staphylokokken-Sepsis, gekennzeichnet durch niedrigen Blutdruck, Fieber und Schüttelfrost, wird durch eine Staphylokokken-Bakteriämie verursacht. Staphylokokken-Sepsis ist eine der Hauptursachen für Schock, Kreislaufkollaps und Tod bei Menschen mit schweren Verbrennungen großer Körperbereiche. Wenn unbehandelt, S. aureus Sepsis führt zu einer Sterblichkeitsrate (Todesrate) von über 80%. Obwohl nicht üblich, S. aureus wurde als Ursache von Chorioamnionitis und neonataler Sepsis in der Schwangerschaft berichtet, aber Streptokokken der Gruppe B sind die häufigste bakterielle Ursache dieser lebensbedrohlichen Erkrankung des Fötus.

Wenn sich die Staphylokokken-Bakterien auf andere Organe ausbreiten, können sie verschiedene Zustände verursachen:

  • Staphylokokken-Pneumonie betrifft überwiegend Menschen mit einer zugrunde liegenden Lungenerkrankung und kann zur Abszessbildung in der Lunge führen.
  • Eine Infektion der Herzklappen (Endokarditis) kann zu Herzversagen führen.
  • Die Ausbreitung von Staphylokokken auf die Knochen kann zu einer schweren Entzündung der Knochen führen, die als Osteomyelitis bekannt ist. Eine septische Arthritis tritt auf, wenn Staphylokokken einen Gelenkspalt infizieren. tritt auf, wenn die Bakterien eine Vene infizieren. Thrombophlebitis durch Staphylokokken tritt am häufigsten bei hospitalisierten Patienten an der Stelle eines Venenkatheters auf.

Staphylokokkeninfektionen sind ansteckend und können von Mensch zu Mensch übertragen werden. Da Eiter aus infizierten Wunden die Bakterien enthalten kann, ist bei der Pflege von Staphylokokken-infizierten Wunden eine angemessene Hygiene und Händewaschen erforderlich.

Staphylokokken-Lebensmittelvergiftung ist eine Erkrankung des Darms, die Übelkeit, Erbrechen, Durchfall und Dehydration verursacht. Es wird durch den Verzehr von Lebensmitteln verursacht, die mit Giftstoffen kontaminiert sind, die von Staphylococcus aureus eher als eine echte Infektion mit den Bakterien. Die Symptome entwickeln sich normalerweise innerhalb von ein bis sechs Stunden nach dem Verzehr kontaminierter Lebensmittel. Die Krankheit dauert in der Regel ein bis drei Tage und heilt von selbst ab. Patienten mit dieser Krankheit sind nicht ansteckend, da Giftstoffe nicht von Mensch zu Mensch übertragen werden.

Das toxische Schocksyndrom ist eine Krankheit, die durch Toxine verursacht wird, die von S. aureus Bakterien, die unter Bedingungen wachsen, in denen wenig oder kein Sauerstoff vorhanden ist. Das toxische Schocksyndrom ist gekennzeichnet durch das plötzliche Auftreten von hohem Fieber, Erbrechen, Durchfall und Muskelschmerzen, gefolgt von niedrigem Blutdruck (Hypotonie), der zu Schock und Tod führen kann. Oft kommt es zu einem sonnenbrandähnlichen Hautausschlag mit Abschälung der Haut. Das toxische Schocksyndrom wurde ursprünglich beschrieben und tritt immer noch vor allem bei menstruierenden Frauen auf, die Tampons verwenden.

FRAGE

Welche Tests verwenden medizinisches Fachpersonal, um eine Staphylokokkeninfektion zu diagnostizieren?

Bei leichten Hautinfektionen diagnostizieren Gesundheitsdienstleister häufig Staphylokokken-Infektionen anhand ihres Aussehens, ohne dass Labortests erforderlich sind. Schwerwiegendere Staphylokokken-Infektionen wie eine Infektion des Blutkreislaufs, Pneumonie und Endokarditis erfordern die Kultivierung von Blutproben oder infizierten Körperflüssigkeiten oder -geweben. Das Labor stellt die Diagnose und führt spezielle Tests durch, um festzustellen, welche Antibiotika gegen die Bakterien wirksam sind.

Was ist der Behandlung bei Staphylokokkeninfektionen?

Kleinere Hautinfektionen werden in der Regel mit einer antibiotischen Salbe wie einem nicht verschreibungspflichtigen Dreifach-Antibiotikum-Gemisch behandelt. In einigen Fällen können bei Hautinfektionen orale Antibiotika verabreicht werden. Wenn Abszesse vorhanden sind, werden diese zusätzlich operativ drainiert. Schwerwiegendere und lebensbedrohlichere Infektionen werden mit intravenösen Antibiotika und unterstützender medizinischer Versorgung im Krankenhaus behandelt.

Ärzte verwenden verschiedene Arten von Antibiotika zur Behandlung von Staphylokokkeninfektionen. Die Wahl des Antibiotikums hängt von der Art und Schwere der Infektion sowie den Resistenzmustern des jeweiligen Bakterientyps ab. Einige der Antibiotika, die zur Behandlung von Staphylokokkeninfektionen verwendet wurden, sind Cefazolin, Cefuroxim, Cephalexin, Nafcillin (Nallpen), Oxacillin (Bactocill), Dicloxacillin, Vancomycin, Clindamycin (Cleocin), Rifampin und Telavancin (Vibativ). Kombinationen von Antibiotika und anderen Antibiotika können ebenfalls verwendet werden. Einige Staphylokokkenstämme wie MRSA (siehe nächster Abschnitt) sind gegen viele Antibiotika resistent.

Welche Arten von Angehörigen der Gesundheitsberufe behandeln Staphylokokken-Infektionen?

Staphylokokkeninfektionen können zunächst von Hausärzten wie Kinderärzten, Internisten und Hausärzten behandelt werden. Ein Notfallmediziner kann den Patienten behandeln, wenn er sich in einer Notaufnahme oder einem Notfallzentrum behandeln lässt. Manchmal suchen Menschen bei Hautinfektionen eine Behandlung von einem Dermatologen auf. Bei schwereren Infektionen, Infektionen der Blutbahn oder Infektionen der inneren Organe kann eine Reihe von Fachärzten erforderlich sein, darunter Spezialisten für Infektionskrankheiten, Kardiologen, Spezialisten für Intensivmedizin, Pneumologen und Chirurgen.

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Was ist antibiotikaresistent S. aureus?

Methicillin-resistent Staphylococcus aureus, bekannt als MRSA, ist eine Art von Staphylococcus aureus die gegen das Antibiotikum Methicillin und andere Medikamente derselben Klasse, einschließlich Penicillin, Amoxicillin und Oxacillin, resistent sind. MRSA ist ein Beispiel für einen sogenannten "Superbug", ein informeller Begriff, der verwendet wird, um einen Bakterienstamm zu beschreiben, der gegen die normalerweise zu seiner Behandlung verwendeten Antibiotika resistent geworden ist. MRSA traten zuerst bei Patienten in Krankenhäusern und anderen Gesundheitseinrichtungen auf, insbesondere bei älteren Menschen, sehr Kranken und solchen mit einer offenen Wunde (wie einem Dekubitus) oder einem Katheter im Körper. In diesen Einstellungen wird MRSA als Health-Care-Associated MRSA (HA-MRSA) bezeichnet.

Inzwischen wurde festgestellt, dass MRSA in der Gemeinde außerhalb von Krankenhäusern und anderen Gesundheitseinrichtungen Krankheiten verursacht und wird in dieser Umgebung als gemeindenaher MRSA (CA-MRSA) bezeichnet. MRSA in der Gemeinde wird mit der jüngsten Verwendung von Antibiotika, dem gemeinsamen Gebrauch von kontaminierten Gegenständen, aktiven Hautkrankheiten oder -verletzungen, schlechter Hygiene und dem Leben in überfüllten Umgebungen in Verbindung gebracht. Die US-amerikanischen Zentren für die Kontrolle und Prävention von Krankheiten (CDC) schätzen, dass heute etwa 12% der MRSA-Infektionen gemeindebedingt sind, aber dieser Prozentsatz kann je nach Gemeinde und Patientenpopulation variieren.

MRSA-Infektionen sind in der Regel leichte oberflächliche Infektionen der Haut, die mit der richtigen Hautpflege und Antibiotika erfolgreich behandelt werden können. MRSA kann jedoch schwierig zu behandeln sein und zu lebensbedrohlichen Blut- oder Knocheninfektionen führen, da weniger wirksame Antibiotika zur Behandlung zur Verfügung stehen.

Die Übertragung von MRSA erfolgt hauptsächlich durch Menschen mit aktiven MRSA-Hautinfektionen. MRSA wird fast immer durch direkten Körperkontakt und nicht über die Luft verbreitet. Die Verbreitung kann auch durch indirekten Kontakt durch Berühren von Gegenständen (wie Handtücher, Laken, Wundverbände, Kleidung, Trainingsbereiche, Sportgeräte) erfolgen, die mit der infizierten Haut einer Person mit MRSA kontaminiert sind. Genauso wie S. aureus auf der Haut oder in der Nase getragen werden können, ohne eine Krankheit auszulösen, MRSA kann auch auf diese Weise getragen werden. Im Gegensatz zu dem relativ hohen (25%-30%) Anteil von Erwachsenen, die von S. aureus in the nose (these people have staph bacteria present that do not cause illness), only about 2% of healthy people carry MRSA in the nose. There are no symptoms associated with carrying staph in general or MRSA in the nose.

A drug known as mupirocin (Bactroban) has been shown to be sometimes effective for treating and eliminating MRSA from the nose of healthy carriers, but decolonization (treating of carriers to remove the bacteria) is usually not recommended unless there has been an outbreak of MRSA or evidence that an individual or group of people may be the source of the outbreak.

More recently, strains of S. aureus have been identified that are resistant to the antibiotic vancomycin (Vancocin), which is normally effective in treating staph infections. These bacteria are referred to as vancomycin-intermediate-resistance S. aureus (VISA) and vancomycin-resistant S. aureus (VRSA).

What are complications of staph infections?

Scalded skin syndrome is a potentially serious side effect of infection with staph bacteria that produce a specific protein that loosens the "cement" holding the various layers of the skin together. This allows blister formation and sloughing of the top layer of skin. If it occurs over large body regions, it can be deadly, similar to a large surface area of the body having been burned. It is necessary to treat scalded skin syndrome with intravenous antibiotics and to protect the skin from allowing dehydration to occur if large areas peel off. The disease occurs predominantly in children but can occur in anyone. It is known formally as staphylococcal scalded skin syndrome.


Staphylococcus

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Staphylococcus, (Gattung Staphylococcus), group of spherical bacteria, the best-known species of which are universally present in great numbers on the mucous membranes and skin of humans and other warm-blooded animals. Der Begriff staphylococcus, generally used for all the species, refers to the cells’ habit of aggregating in grapelike clusters. Staphylococci are microbiologically characterized as gram-positive (in young cultures), non-spore-forming, nonmotile, facultative anaerobes (not requiring oxygen).

Of significance to humans are various strains of the species S. aureus und S. epidermidis. Während S. epidermidis is a mild pathogen, opportunistic only in people with lowered resistance, strains of S. aureus are major agents of wound infections, boils, and other human skin infections and are one of the most common causes of food poisoning. S. aureus also causes meningitis, pneumonia, urinary tract infections, and mastitis, an infection of the breast in women or of the udder in domestic animals. In addition, local staphylococcal infections can lead to toxic shock syndrome, a disease associated with the liberation of a toxin into the bloodstream from the site of infection.

One strain that is of great concern to humans is methicillin-resistant S. aureus ( MRSA), which is characterized by the presence of a single mutation that renders it resistant to methicillin, a semisynthetic penicillin used to treat staphylococcus infections that are resistant to mold-derived penicillin. This strain of S. aureus was first isolated in the early 1960s, shortly after methicillin came into wide use as an antibiotic. Today methicillin is no longer used, but the strain of MRSA to which it gave rise is commonly found on the skin, in the nose, or in the blood or urine of humans. Some 50 million people worldwide are believed to carry MRSA, which is readily passed by skin contact but rarely causes infection in healthy individuals. However, very young children and elderly or ill patients in hospitals and nursing homes are particularly susceptible to MRSA infection, which is difficult to treat because of its resistance to most antibiotics. The treatment of MRSA infections with vancomycin, an antibiotic often considered as a last line of defense against MRSA, has led to the emergence of vancomycin-resistant S. aureus (VRSA), against which few agents are effective. In 2005 in the United States, deaths from MRSA (approximately 18,000) surpassed deaths from HIV/AIDS (approximately 17,000), underscoring the need for improved surveillance to prevent and control the spread of this potentially lethal organism.

Dieser Artikel wurde zuletzt von Kara Rogers, Senior Editor, überarbeitet und aktualisiert.


Identification and ecology of bacterial communities associated with necroses of three cactus species

To compare the bacterial communities residing in necrotic tissues of columnar cacti of the Sonoran Desert, isolates from 39 organ pipe, 19 saguaro, and 16 senita cacti were obtained. The isolates were clustered into 28 conspecific groups on the basis of their fatty acid profiles. The distributions of the individual bacterial isolates varied among cactus species. Seven of the 28 species groups were unique to a particular cactus species, whereas 8 species groups were found in all three cacti. The effective number of bacterial species for each cactus species was positively correlated with both the chemical complexity and glucose concentration of the plant tissues. The effective number of bacterial species and bacterial distribution patterns were compared with those known for communities of cactophilic yeasts. The observed bacterial distribution patterns are most likely due to differences in the chemical compositions of the three cactus species.


Schau das Video: Wie wirken Antibiotika?! (Juli 2022).


Bemerkungen:

  1. Marian

    die unvergleichliche Botschaft)

  2. Yavu

    Können Sie mir sagen, wo ich ein neues iPhone kaufen soll? Ich kann es in Moskau einfach nicht finden ...

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